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仙人掌提取物的分离及其抑菌性能的研究

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目录

文摘

英文文摘

第一章文献综述

第二章仙人掌抑菌作用及其稳定性分析

第三章仙人掌抑菌活性物质的提取工艺研究

第四章仙人掌中皂甙类和黄酮类物质的提取分离

第五章仙人掌提取物抑菌机理的研究

第六章总结和展望

参考文献

附录

致 谢

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摘要

本文对仙人掌提取物的分离及抑菌性能进行研究,包括抑菌谱及最低抑菌浓度的确定,通过比较不同提取溶剂对抑菌活性的差异,筛选出最佳的提取剂,探讨了提取物的稳定性,优化了抑菌活性物质的提取工艺,并进一步对抑菌活性物质进行分离,最后对仙人掌提取物影响微生物正常代谢的作用机理进行了研究,结果如下: 1.试验确定了仙人掌提取物的抑菌谱,证明仙人掌醇提取物对细菌有良好的抑制作用,霉菌次之,酵母菌最弱,特别是对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制作用最显著,其最低抑菌浓度均低达6.25%。以大肠杆菌、根霉和酵母菌为指示菌,研究了仙人掌提取物的稳定性。结果表明,提取物的抑菌活性具有较好的热稳定性,对紫外光照射稳定,在中性和酸性条件下的抑菌效果较佳。 2.不同溶剂的提取物的对同一种菌的抑制作用差别较大,其中以甲醇和70%乙醇最好,实验结果依次排序为:甲醇>70%乙醇>乙酸乙酯>正己烷。在相同的时间内,提取液的浓度越高,抑菌率越高;相同浓度的提取液,作用时间越长,抑菌率也越高。 3.不同预处理方式对仙人掌提取物抑菌活性有一定的影响,以仙人掌干粉提取物的抑菌活性最好。仙人掌提取物的抑菌活性随着溶剂极性的增、大而增强,其中以70%的乙醇为最适提取剂。在单因素实验的基础上,采用RSA法试验设计,优化出最佳提取条件为:乙醇浓度72%(v/v)、提取温度58℃、料液比1:27(g/mL)。在此最优工艺条件下,仙人掌提取物的抑菌效果最好。 4.对影响仙人掌黄酮类和皂甙类化合物提取率的相关因素进行了分析,运用L<,9>(3<'4>)正交设计试验得出了仙人掌中黄酮类和皂甙类化合物的最佳的提取工艺条件。 5.1山人掌提取物抑菌机理研究:通过试验发现仙人掌皂甙类和仙人掌黄酮类提取物对微生物糖酵解、三羧酸、磷酸戊糖等途径均有不同程度的抑制作用,导致了ATP和还原力NADPH缺乏从而引起了代谢障碍;绘制出正常大肠埃希氏菌和仙人掌提取物作用下该菌的对比生长曲线,结果表明提取物主要抑制了细菌对数生长期的分裂;运用SDS-PAGE电泳的方法检测发现,在一定浓度仙人掌提取物作用下菌体的表达蛋白谱带比正常菌体的表达蛋白谱带明显减少,一些特有谱带消失,仙人掌黄酮类和皂甙类提取物比单纯粗提取物对菌体的表达蛋白正常代谢的干扰更强,可以说明仙人掌提取物对供试菌的细胞内蛋白表达调控机制有一定的干扰作用;运用透射电镜对被抑制不同时间段的指示菌进行观察可知,供试菌的形态结构受仙人掌提取物作用发生很大的畸变。总之,仙人掌提取物扰乱了茵体细胞内正常的代谢活动,导致细胞不再生长、繁殖,达到抑菌的目的。

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