禽1型副粘病毒鸡源和鸭源毒株的分离与鉴定及毒力的测定

摘要

禽1型副粘病毒(APMV-1)，长期以来一直是危害养禽业的主要病原之一。APMV-1主要引起鸡的新城疫、鹅1型副粘病毒病、鸽1型副粘病毒病等，但近年来APMV-1感染并致病的宿主范围有扩大的趋势，而且有报道显示，不同禽源的APMV-1分离株的毒力及其相关基因、致病性和免疫原性等生物学特性并非完全一致。因此，对APMV-1各种不同禽源分离株的主要生物学特性进行研究,这对于探索病毒的进化及其在不同禽类之间感染与传播的机制、以及疾病的流行病学都是十分必要的。 本研究对来自临床可疑为APMV-1感染的患病鸡、鸭进行了病毒分离和鉴定，并对分离株按鸡新城疫病毒(NDV)的经典方法进行毒力的测定。结果表明，分别从临床患病家禽分离到的毒株GXD070035、GXD070036(鸭源)及GXcn、GXcx(鸡源)，经血凝试验(HA)和用单克隆抗体所进行的血凝抑制(HI)试验以及实验室建立的NDV RT-PCR快速鉴别诊断技术的鉴定，证明均属APMV-1；经测定，鸭源分离株GXD070035、GXD070036的鸡胚平均死亡时间(MDT)值分别为85.80h和79.20h，1日龄鸡脑内接种致病指数(ICPI)值分别为1.34和1.53，符合“中发型(mesogenic)”毒株的特征；鸡源分离株GXcn和GXcx的MDT值分别为41.60h和51.40h，ICPI值分别为1.81和1.69，符合“速发型(velogenic)”毒株的特征。毒力测定结果均与毒株在临床上的致病情况相符。本研究的结果表明，不同禽源分离株的主要生物学特性是存在差异的，而这种差异的分子机制及其在疾病流行病学中的意义有待于进一步的研究。

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前言

第一章新城疫病毒生物学特性的研究进展

1病毒的形态和结构

2病毒的基因组结构及其功能

2.1 F蛋白的分子生物学研究进展

2.2 HN蛋白的分子生物学研究进展

2.3 M蛋白及其分子生物学研究进展

2.4NP蛋白、P蛋白和L蛋白及其分子生物学研究进展

3 NDV各种禽源分离株的毒力和致病性的研究进展

3.1 NDV毒力测定的方法

3.2不同禽源分离株的致病性试验

4临床症状

5病理变化

6 NDV的实验室诊断方法

6.1血清学方法

6.2分子生物学诊断技术研究进展

7疫苗免疫

7.1免疫的理论基础

7.2鸡新城疫疫苗的种类和应用

7.3疫苗免疫和保护试验

8结语

第二章禽1型副粘病毒鸡源和鸭源毒株的分离与鉴定及毒力的测定

1材料

1.1病料

1.2试验的鸡胚、鸭胚和家禽

1.3单抗

1.4试剂

1.5引物设计

1.6主要仪器

2方法

2.1病毒分离

2.2鸡胚尿囊液的HA和HI试验

2.3 APMV-1的快速鉴别诊断方法

2.4各分离毒株的毒力测定

3结果

3.1死亡鸡胚的细菌检查结果和胚体的病理变化

3.2分离毒株的HA和HI试验结果

3.3 RT-PCR扩增的结果

3.4各分离毒株的MDT和ICPI的测定结果

4讨论与小结

结论

参考文献

致谢

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攻读学位期间发表论文情况

参加研究课题情况