大叶栎组织培养快速繁殖技术

摘要

本文以大叶栎（Castanopsis fissa（Champ．） Rchd．et．Wils．）新生萌芽条为试材，从无菌体系建立、继代增殖、生根诱导、愈伤组织诱导与分化、移栽等环节进行研究，探索大叶栎组织培养技术，培育出大叶栎组织培养无菌苗，建立大叶栎离体再生体系，提出合理完善的大叶栎继代增殖、诱导生根、无菌苗移植方法，为大叶栎工厂化育苗提供科学完善的理论基础，研究结果表明：
　　 （1）大叶栎富含单宁类多酚物质，茎段多酚类物质含量约为2％-3％，且顶位茎段多酚类物质含量>中位茎段>基部茎段，多酚类物质含量与初代诱导褐变死亡率显著正相关，相关系数为0.899。
　　 （2）大叶栎离体组织培养最适外植体为新生萌芽条中位芽，多酚类含量低，为2％，褐变死亡率小，为20％，诱导分化率最高。
　　 （3）预处理的外植体经75％酒精表面消毒30s，无菌水冲洗2次，0.3％HgCl2灭菌6min，无菌水冲洗4次，可达良好的消毒效果。
　　 （4）最适大叶栎初代诱导培养基为：1/2MS I+2g/L活性炭+0.3 mg/L抗坏血酸+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L，活性炭吸附剂与抗坏血酸等褐变抑制剂，可有效的降低褐变死亡率；0.5mg/L6-BA与0.5mg/L NAA是初代培养最好的激素配比，腋芽分化最好。
　　 （5）1/2MS I+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+IBA0.1mg/L或1/2MS I+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+IBA0.5mg/L或1/2MS I+6-BA0.5 mg/L+NAA0.1mg/L为适合继代增殖诱导的培养基，能很好的促进不定芽的增值。
　　 （6）最适生根诱导培养基为1/2MS I+NAA1.0mg/1+IBA1.0mg/L，生根率高达84.62％，苗木质量好，且根从茎段基部长出，容易成活。
　　 （7）以叶片为外植体诱导愈伤组织有三种：绿色，疏松型；浅黄褐色，略透明，疏松型；白色，致密型；而以茎段基部愈伤组织为外植体诱导的愈伤组织为黄褐色致密型，在附加6-BA1.0+NAA0.1+IBA0.1、6-BA5.0+NAA0.1+IBA0.1、GA35.0+NAA0.1、GA35.0的培养基上分别诱导出无根苗，在6-BA1.0+NAA0.1+IBA0.1、GA35.0培养基上分化出叶。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：本文使用缩写符号

声明

第一章 引言

1.1 大叶栎优良特性

1.2大叶栎研究进展

1.2.1 大叶栎遗传变异和遗传改良方面的研究

1.2.2大叶栎栽培方面的研究

1.2.3大叶栎无性繁殖方面的研究

1.2.4大叶栎特性与利用方面的研究

1.3 大叶栎组织培养快速繁殖技术的研究意义

1.4植物组织培养研究进展

1.4.1 植物组织培养理论基础

1.4.2植物快繁与无病毒种苗生产

1.4.3愈伤组织培养

1.4.4植物花粉培养和单倍体育种

1.4.5植物胚胎培养

1.4.6愈伤组织或细胞悬浮培养生产次生代谢物

1.4.7原生质体培养与细胞融合

1.4.8植物细胞突变体筛选

1.4.9体细胞胚胎和人工种子

1.4.10组织细胞培养物的超低温保存及种质库建立

第二章 材料与方法

2.1 试验材料

2.2 培养条件

2.3试验方法

2.3.1 萌蘖条的诱导

2.3.2大叶栎初代诱导培养

2.3.3继代增殖培养

2.3.4大叶栎生根诱导培养

2.3.5生根苗移栽与管理

2.3.6愈伤组织诱导

2.4数据统计分析

第三章 结果与分析

3.1 大叶栎新生萌芽条的诱导

3.2大叶栎初代诱导培养

3.2.1 无菌材料的建立

3.2.2褐变

3.2.3 激素对大叶栎初代诱导培养的影响

3.3继代增殖培养

3.3.1 基本培养基对大叶栎组培苗增殖生长的影响

3.3.2不同激素浓度配比对大叶栎组培苗增殖生长的影响

3.3.3不同单株继代增殖培养

3.4大叶栎生根诱导培养

3.4.1 不同激素浓度配比对大叶栎生根诱导的影响

3.5生根苗移栽与管理

3.6愈伤组织诱导与分化

3.6.1 愈伤组织培养

3.6.2愈伤组织分化诱导培养

第四章 结论与讨论

4.1 结论

4.1.1 大叶栎新生萌芽条的诱导

4.1.2大叶栎多酚类物质含量测定

4.1.3大叶栎初代培养

4.1.4大叶栎继代增殖培养

4.1.4大叶栎生根诱导

4.1.5大叶栎移栽

4.1.6大叶栎愈伤组织诱导

4.2讨论

4.2.1 大叶栎初代培养

4.2.2大叶栎继代增殖培养

4.2.3大叶栎生根诱导

4.2.4大叶栎组培苗移栽

4.2.5大叶栎愈伤组织诱导与分化

参考文献

图版及图版说明

致谢

攻读学位期间发表论文情况