药用植物穿心莲组培快繁及其影响因子的研究

摘要

本试验研究穿心莲的组培快繁及其影响因子，建立和优化穿心莲快速繁殖体系。试验结果如下：
　　 1、将穿心莲种子灭菌培养获得试管实生苗，用实生苗叶片为外植体，进行愈伤组织的诱导、继代和分化试验，确定诱导愈伤组织的最佳培养基是MS+2，4-D2.0mg/L+6-BA2.0mg/L+蔗糖3％+琼脂0.6％，愈伤组织诱导率高达100％，少数发生褐化；添加3mg/L的AgNO3可诱导胚性愈伤组织的产生，同时减少褐化的愈伤块数。愈伤组织继代3次后进行分化试验，得出穿心莲愈伤组织分化的最佳培养基是：MS+NAA0.1mg/L+6-BA1.0mg/L+蔗糖3％+琼脂0.6％，分化率最高达84％，分化不定芽长势良好。
　　 2、不定芽的增殖：将大田生长健壮的穿心莲带腋芽茎段进行灭菌培养，获得试管苗，诱导不定芽形成。不同激素组合、光照强度、温度、糖浓度以及继代次数对穿心莲试管苗的快繁都有很大的影响，优化培养条件，得出最适合不定芽增殖的培养基配方是MS+KT1.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖6％+琼脂0.7％，丛生芽数多达160个，不定芽增殖率高达533.7％；30001x是最佳的光照强度；30℃是最适合的温度，适宜继代次数为3代以内。
　　 3、试管苗生根试验：将健壮试管苗接入生根培养基生根，得出最适合试管苗生根的培养基是1/2MS+NAA1.0mg/L+蔗糖2％+琼脂0.6％，生根率高达80％，平均生根数达到6条/株，平均根长为2.5cm，长出的根粗壮。
　　 4、降低玻璃化苗试验：提高培养基琼脂浓度和添加KNO3可以有效减少试管苗玻璃化，但是不定芽高增值率和低玻璃化率存在矛盾，琼脂浓度为0.7％时培养基的软硬度适中，有利于穿心莲不定芽的增殖，而且玻璃化率不高，只有5％左右；抑制穿心莲玻璃苗产生的最佳KNO3浓度是1000mg/L。
　　 5、玻璃化苗逆转试验：穿心莲试管苗玻璃化程度可分为3个等级，将不同等级的玻璃化苗分别接种在优化培养基MS+KT1.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖6％+琼脂0.7％上，利用自然散射光培养，结果表明优化培养条件可以使部分玻璃苗发生逆转，恢复正常生长。
　　 综上所述：以穿心莲茎段或顶芽为外植体进行快速繁殖试管苗，已建立并优化了穿心莲快速繁殖体系，为实现工厂化育苗以及相关方面的研究提供了可靠的理论依据。