金樱子组织培养研究

摘要

金樱子为我国传统常用中药材，一般以果实、叶和根入药。金樱子在药品、保健品方面具有广泛的应用和开发前景，近年其用途的不断拓宽使得该植物一直处于过度开发的境地，部分地区的野生资源面临着枯竭。利用组织培养技术可加快人工栽培，保护金樱子野生资源，满足市场的大量需求。因此进行金樱子组培培养研究，具有很重要的实践意义。
　　 本试验选用广西药用植物园引种的金樱子为试材，对金樱子进行外植体选择、外植体灭菌、外植体褐化控制、初代培养、继代培养、玻璃化苗控制、生根培养及炼苗移栽等方面的研究，以此建立金樱子离体培养快繁体系，以期解决金樱子人工栽培中种苗短缺问题。主要研究结果如下：
　　 1、金樱子半木质化新梢中部带芽茎段为最佳外植体，外植体取材较佳时间为2月中旬至4月上旬。
　　 2、金樱子外植体较好的灭菌方法为先用75％酒精浸泡20s，再用0.1％升汞溶液浸泡8min，污染率可控制在25％以下，成活率可保持在85％以上；外植体灭菌后，用80mg/L的抗生素溶液浸泡30min可有效抑制细菌的滋生，污染率仅为11.1％，且对植物的致毒作用不大。
　　 3、抗坏血酸和活性炭均对外植体褐变有抑制作用，Vc最佳浓度为0.7g/L，Ac最佳浓度为0.5g/L；低温处理可减轻外植体褐变，处理18h褐变率仅为21.9％。
　　 4、初代诱导培养基以MS+6-BA1.8mg/L+KT0.2mg/L+NAA0.2mg/L最好，其丛生芽诱导系数为8.6。
　　 5、最佳继代增殖培养基为MS+6-BAl.5mg/L+KT0.2mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖25g/L+琼脂4.5g/L，其增殖系数高达12.0；继代培养时间40d最佳；GA3能促进金樱子瓶苗的伸长，较佳浓度为1.0mg/L，1.5mg/L，2.0mg/L，三者之间无显著差异。
　　 6、玻璃化苗与蔗糖浓度、琼脂浓度呈负相关，蔗糖用量以25mg/L-30mg/L为宜，琼脂用量以4.5-5.0g/L为宜；金樱子芽苗玻璃化与6-BA浓度呈正相关，浓度应控制在1.5mg/L以下。
　　 7、最佳生根培养基为1/4MS+IBA0.2mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖20g/L，其生根率达100％，生根时间短，根多、粗壮。
　　 8、对根系3条以上的健壮瓶苗，进行闭瓶炼苗6d，开瓶炼苗2d，移栽成活率在95％以上；移栽基质以塘泥：河沙(1：3)较佳；光照强度以遮光率为60％左右为宜。