声明
摘要
缩写及符号说明
1．1柑橘黄龙病的发生与危害
1．1．1柑橘黄龙病的发生
1．1．2柑橘黄龙病的症状与危害
1．1．3柑橘黄龙病的传播途径
1．2柑橘黄龙病的病原与病原寄主
1．2．1柑橘黄龙病病原
1．2．2柑橘黄龙病病原菌培养
1．2．3柑橘黄龙病病原寄主
1．3柑橘黄龙病的诊断
1．3．2血清学方法诊断
1．3．3指示作物鉴定法
1．3．4病原显微镜观察法
1．3．5分子生物学诊断
1．3．6光谱诊断
1．4柑橘黄龙病的防控
1．5研究目的意义
1．6技术路线
2．1材料
2．1．1植物材料
2．1．2菌株与质粒
2．2主要试剂
2．3主要溶液配制
2．4主要仪器设备
2．5实验方法
2．5．1柑橘黄龙病菌外膜蛋白omp多克隆抗体的研制
2．5．2柑橘黄龙病可视化环介导等温扩增(LAMP)检测体系建立
3结果与分析
3．1柑橘黄龙病菌外膜蛋白omp多克隆抗体的研制
3．1．1总核酸的提取与黄龙病菌的PCR检测
3．1．2引物设计
3．1．3 ompl目的片段克隆
3．1．4原核表达载体构建
3．1．5重组蛋白诱导表达
3．1．6重组蛋白表达形式鉴定
3．1．7重组蛋白Western Blot验证
3．1．8重组蛋白纯化
3．1．9多克隆抗体效价检测
3．1．10多克隆抗体检测田间样品效果测试
3．2柑橘黄龙病可视化环介导等温扩增(LAMP)检测体系建立
3．2．1柑橘黄龙病LAMP引物设计与合成
3．2．2柑橘黄龙病LAMP预实验
3．2．3柑橘黄龙病LAMP体系Mg2+浓度优化
3．2．4柑橘黄龙病LAMP体系dNTP浓度优化
3．2．5柑橘黄龙病LAMP体系内外引物浓度比例优化
3．2．6柑橘黄龙病LAMP体系Bst DNA聚合酶大片段浓度优化
3．2．7柑橘黄龙病LAMP反应温度优化
3．2．8柑橘黄龙病LAMP反应时间优化
3．2．9柑橘黄龙病LAMP检测结果可视化方法的比较
3．2．10柑桶黄龙病LAMP特异性检测
3．2．11柑橘黄龙病LAMP灵敏度检测
3．2．12柑橘苗木与田间植株黄龙病的检测
4．1讨论
4．1．1柑橘黄龙病病原菌外膜蛋白omp多克隆抗体的研制
4．1．2柑橘黄龙病可视化环介导等温扩增(LAMP)体系建立
4．2结论
4．3创新性
参考文献
致谢
攻读学位期间参与科研及发表论文情况
广西大学;
