BRAF V600E基因突变与甲状腺乳头状癌关系的临床研究

摘要

目的：探讨BRAFV600E基因突变与甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)相关临床病理学参数的关系，通过对BRAFV600E的检测，进一步提高对PTC的临床诊断水平，指导PTC的手术切除范围、判断患者的预后效果、指导术后后继治疗及开展以BRAF基因为靶点的分子生物学治疗积累相关的研究资料。
　　方法：收集蚌埠医学院第一附属医院2009年1月～2011年8月间经手术切除的60例甲状腺乳头状癌,20例甲状腺良性病变（甲状腺腺瘤，结节性甲状腺肿）。采用基因组DNA提取试剂盒提取手术标本的DNA，PCR扩增BRAF基因15外显子，通过对PCR产物进行DNA序列双向测序。采用统计软件SPSS17.0分析PTC与甲状腺良性病变组织中BRAFV600E基因突变率的差异，并对PTC的各临床病理学因素中BRAFV600E基因突变情况进行分析。统计方法用χ2检验,检验标准为0.05。
　　结果：1. BRAFV600E基因突变在 PTC组织中突变率为65％（39/60），而在甲状腺良性病变组织中突变率为0%（0/20）。PTC组织中BRAFV600E突变率明显高于甲状腺良性病变组织，经χ2检验两组间有显著性差异（χ2=25.366,P＜0.001）。经 DNA正反双向测序证实为错义突变，即第15外显子的单个碱基错义突（T1799A）。2.BRAFV600E基因 T-1799-A突变率在患者性别组间差异无统计学意义（χ2=0.011， P＞0.05）；在年龄组间（≥45岁或＜45岁）差异具有显著性意义（χ2=4.667，P＜0.05）；在肿瘤大小组间（≥2cm或差异无统计学意义(χ2=2.336，P＞0.05)；在病理学亚型组间(经典型、滤泡亚型、高细胞型）,差异有统计学意义(χ2=6.213，P＜0.05)；临近组织受侵犯组中BRAFV600E基因突变率明显高于未受侵犯组，两组间差异具有显著性意义(χ2=6.275，P＜0.05）；在有无颈部淋巴结转移组间，差异有统计学意义（χ2=6.429，P＜0.05）；在临床分期组间（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ～Ⅳ期各为一组），两组间BRAFV600E基因突变率差异有统计学意义（χ2=10.066，P＜0.05）。
　　结论：1、BRAFV600E基因突变在PTC患者中检出率高，而未见于甲状腺良性病变，提示BRAFV600E基因突变可作为鉴别PTC与甲状腺良性病变的分子生物学指标。2、BRAFV600E基因突变与 PTC临床病理学特征有着密切联系，可能作为一种新的标准来衡量PTC患者的危险程度。

目录

封面

声明

目录

中文摘要

英文摘要

前言

材料与方法

一 、标本

二、实验试剂与仪器

三、实验操作方法与步骤

四、统计学处理

结果

一 、BRAFV600E在甲状腺乳头状癌组织和癌旁正常组织中突变

讨论

一、发生BRAF V600E突变PTC患者的临床特征

二、对PTC诊断、治疗的价值

三、PTC的分子靶向治疗

结论

参考文献

致谢

附录 A缩 略 词 表

附录B试剂配制方法

附录 C

附录D: 综述: BRAF V600E 基因突变与甲状腺乳头状癌

附录E攻读学位期间发表的学术论文