重组基因体系pCKM-mPTH治疗甲状旁腺功能低下症的实验研究

摘要

本研究构建了骨骼肌特异性启动子pCKM与突变型甲状旁腺激素原基因的重组基因表达体系pCKM-mPTH质粒，在体外转染骨骼肌细胞；体内转染甲旁低动物模型骨骼肌，观察PTH的转录水平及血清浓度变化，探讨pCKM-mPTH质粒对甲旁低的治疗作用，旨在采用基因工程技术为治疗甲旁低提供不受共体来源限制，避免使用免疫抑制剂的新方法，为研究甲旁低的基因治疗奠定基础。 本研究结果表明，利用重叠PCR技术可以很方便地自基因组DNA中获得甲状旁腺激素原的cDNA，而PCR的定点突变技术可以同时将Fruin识别和切割位点引入ProPTH的N-端；成功构建了SD大鼠重组基因表达体系pCKM-mPTH质粒；改造后的甲状旁腺激素原能被furin酶裂解成为有活性的甲状旁腺激素，以及有活性的甲状旁腺激素能够排泌到细胞外；应用pCKM-mPTH质粒治疗SD大鼠的甲状旁腺功能低下症是有效的。

目录

论文说明：英文缩写词汇表

摘要

前言

第一部分 重组表达体系pCKM-mPTH的构建

引言

材料与方法

结果

讨论

小结

第二部分 重组表达体系pCKM-mPTH的体外实验

引言

材料与方法

结果

讨论

小结

引言

材料与方法

结果

讨论

小结

结论

创新与展望

参考文献

附录二在学期间发表的论文

致谢

原创性声明