抗原致敏IL-12基因修饰的树突状细胞诱导抗肾癌免疫的体外研究

摘要

肾癌(RenalCellCarcinoma，RCC)是最常见的肾脏实质性恶性肿瘤。树突状细胞在肿瘤免疫中的基础地位确立以来，肾癌的免疫治疗取得了较大的进展。树突状细胞是目前公认的体内功能最强的抗原提呈细胞(antigenpresentingcell，APC)，是机体内启动免疫反应的关键因素。DC摄取肿瘤抗原，提呈抗原给T淋巴细胞，诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocytes，CTL)增殖、活化，产生特异性抗肿瘤细胞免疫。因此，构建一种以DC为基础的瘤苗，对DC进行一定的修饰，以改善肿瘤局部的微环境、增强DC的免疫功能，进而遏制肿瘤免疫逃脱。　　本研究将能发挥重要抗肿瘤作用的IL-12基因转染DC，再用肿瘤粗提抗原Ⅰ致敏DC，构建成一种以DC为基础的多价瘤苗，使其在有效提呈抗原的同时又持续高分泌IL-12因子，更有效地诱导T淋巴细胞增殖、活化，进而诱导特异性抗肿瘤免疫。从分子及细胞学水平观察DC多价瘤苗体外诱导自体T淋巴细胞产生特异性抗肾癌免疫的效能，并对结果进行分析。目的：1.第一部分：树突状细胞的体外扩增培养。对传统培养方法改良，掌握从外周血单个核细胞(PBMC)中分离培养DC的方法。2.第二部分：以树突状细胞为基础的DC多价瘤苗的制备。联合用肿瘤抗原致敏和IL-12基因修饰方法，构建一种以DC为基础的多价瘤苗，并从分子水平上检测该瘤苗的免疫状态。3.第三部分：DC多价瘤苗诱导抗肾癌免疫的体外实验。在体外用DC多价瘤苗诱导T淋巴细胞增殖、活化，从细胞水平上检测该瘤苗的免疫效能。

目录

文摘

英文文摘

前 言

第一部分树突状细胞的体外扩增培养

引言

材料与方法

结 果

讨 论

结 论

第二部分以树突状细胞为基础的DC多价瘤苗的制备

引言

材料与方法

结 果

讨 论

结 论

第三部分DC多价瘤苗诱导抗肾癌免疫的体外实验

引言

材料与方法

结 果

讨 论

结 论

总 结

参考文献

附 图

致 谢

原创性声明