整合素连接酶在慢性移植肾病中的作用与机制

摘要

目的：探讨整合素连接酶(ILK)在慢性移植肾病(CAN)的作用与机制。方法：实验组肾移植受体为近交系雄性Lewis大鼠40只，供体为近交系雄性Fisher大鼠40只，依照标准的慢性移植肾病大鼠模型要求行左肾原位移植，术后7天切除右肾。对照组分别为单纯右肾切除的Lewis大鼠及Fisher大鼠各25只。分别于4周、8周、12周、16周及24周时收获大鼠，同时做肾功能、肾组织学检测，应用免疫组织化学与Western-blot方法测定肾组织中ILK的表达，RT-PCR方法检测ILKmRNA表达，同时分别运用免疫组化、Western-blot方法检测ILK作用有关的信号传导通路磷酸化蛋白激酶B(pAKT)、磷酸化糖原合成酶3β(pGSK-3β)及其效应因子磷酸化肌球蛋白轻链(pMLC)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果：移植组大鼠尿蛋白定量、血清肌酐水平16周时显著增高，24周时更为显著。移植4周时肾间质可见单个核细胞浸润，12周时可见血管平滑肌细胞的移行与增殖，24周时可见轻度肾间质纤维化、血管硬化及管腔狭窄。RT-PCR结果显示，移植组各时相ILKmRNA表达水平显著高于同时相F344对照组或LEW对照组，且随着移植时间的延长，ILKmRAN表达水平有逐步增高趋势。移植组各时相ILK、pAKT、pMLC、VEGF表达水平显著高于同时相F344或LEW对照组，pGSK-3β显著低于同时相Fisher或Lewis对照组，且随着移植时间的延长这一趋势更为显著；移植4W组MMP-9表达水平显著增高，16W、24W是则显著低于同时相对照组。Spearman等级相关分析结果显示，肾移植大鼠在ILK表达水平与肾间质单个核细胞浸润、肾间质纤维化、肾小球硬化及血管硬化程度呈显著正相关，与pAKT、pMLC、VEGF、MMP-9表达水平呈显著正相关，与pGSK-3β表达呈负相关。结论：ILK在慢性移植肾病病理变化中发挥重要作用，其机制可能是通过作用于AKT、GSK传导通路，进而导致移植肾组织肾间质单个核细胞浸润、血管平滑肌细胞的增殖及向内膜层迁移及肾间质纤维化改变，这一作用主要通过MMP-9、pMLC及VEGF的表达上调发挥作用。

目录

缩写词

前言

第一部分整合素连接激酶在大鼠慢性移植肾病中的作用与机制探讨

材料与方法

结果

讨论

参考文献

附

第二部分ILK与CAN早期肾间质单个核细胞浸润中的作用与机制

材料与方法

结果

讨论

参考文献

附图

第三部分ILK与CAN早期肾小动脉血管平滑肌移行增殖的关系与机制

材料与方法

结果

讨论

参考文献

附图

第四部分ILK与CAN大鼠纤维化及硬化性病变中的作用与机制

材料与方法

结果

讨论

参考文献

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