高蛋氨酸膳食对ApoE小鼠血浆Hcy及主动脉p53表达的影响

摘要

动脉粥样硬化(Atheresclerosis，As)严重危害人类健康，其发病机制较为复杂。膳食结构与As的发生发展密切相关，高蛋氨酸膳食促进As形成的原因存在较多争议，至今尚未阐明。以往多数学者认为高蛋氨酸膳食促进血浆中同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)浓度升高，产生高半胱氨酸血症(Hyperhomocysteinemia，HHcy)，影响血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、血小板以及凝血系统的功能从而导致As形成。但最近越来越多的资料显示血浆中Hcy浓度升高并不一定与As形成相关。如在胱硫醚β合成酶(cystathionineβ-synthase，CBS)缺陷小鼠的动物模型中，尽管血浆中Hcy浓度很高却只能观察到血管功能发生了改变，而不能观察到As损伤。在对挪威和芬兰人群的一项前瞻性研究也表明Hcy升高与As间没有相关性。PierreAmbrosi在高蛋氨酸膳食诱导HHcy猪模型中发现补充5mg/d叶酸虽能使血浆中Hcy水平恢复正常，却不能减轻动脉损伤和血栓形成。最近AronM.Troen等人以载脂蛋白E基因缺陷小鼠(ApoE-/-)为研究对象时发现饲喂高蛋氨酸的同时补充叶酸和B族维生素时血浆中的Hcy正常，但该动物仍可形成As。另外，Zhou等人发现用高脂和高蛋氨酸膳食饲喂ApoE-/-小鼠，与对照组小鼠相比在前3个月主动脉弓的损伤面积较大，但饲喂到12个月后两组间损伤面积没有显著差异，从而提示As形成过程中血浆中Hcy升高很可能是一个短暂的适应性反应过程。总之，高蛋氨酸膳食促进As形成与血浆中Hcy的关系值得进一步探讨。 蛋氨酸(methionine)是一种含硫的氨基酸，其体内代谢中间产物S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine，SAM)是体内DNA发生甲基化的主要甲基供体，As易感动物(如ApoE-/-小鼠)摄入高蛋氨酸膳食后，甲基供体SAM增加，可能导致某些基因启动子的高甲基化，使其表达降低或沉默。 As是一种多因素的慢性炎性疾病，其病理过程包括泡沫细胞的形成，平滑肌细胞增殖、凋亡等系列事件，特别是平滑肌的迁移、增殖是As形成过程中的一个非常明显的病理学特征。许多基因，特别是调控细胞增殖的基因，与动脉粥样硬化的发生密切相关。抑癌基因p53具有抑制增殖和促凋亡的作用，但关于p53在动脉粥样硬化中的作用，目前不是很明确。Guevara等人通过对比p53-/-/ApoE-/-和p53+/+/ApoE-/-两种动物模型发现，p53-/-/ApoE-/-的小鼠主动脉斑块面积增大，用溴脱氧尿苷(bromodeoxyuridine，BrDU)标记法发现斑块增大是由于细胞增殖率增大。Vlijmen等人利用该模型进一步的研究发现，增大的斑块中含有更多的巨噬细胞、T细胞，且用BrDU标记发现大部分增殖的细胞是巨噬细胞。因此认为p53缺乏可增大动脉粥样硬化斑块的面积，其原因可能是p53表达降低引起巨噬细胞增殖。最近JohnMercer等人又发现内源性P53可降低血管平滑肌细胞和基质细胞的凋亡，促进巨噬细胞的凋亡，从而抑制动脉粥样硬化的发生。 很多研究都发现在动脉粥样硬化的斑块细胞中p53表达降低，但JohnMercer等人发现P53在斑块中的表达比普通血管高，然而斑块中的不同细胞，其内源性p53水平表达量不同。因此p53在动脉血管中表达量不一，存在争议。有关调节p53表达降低的机制存在较多争议，目前大多研究认为是通过启动子甲基化介导的。总之p53在As的动脉血管中表达量存在争议，其表达改变的机制目前也不太明确，有待进一步研究。 本课题以ApoE-/-小鼠为实验模型，膳食中补充高蛋氨酸或B族维生素，通过观察主动脉窦早期斑块的病理学变化，测定血浆中叶酸、VB12以及Hcy的浓度，检测主动脉P53mRNA和蛋白的表达水平，研究高蛋氨酸膳食促进As的形成与血浆中Hcy水平以及P53表达变化的关系，为As的有效预防提供理论基础和实验依据。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

第1章前言

第2章材料与方法

第3章结果

第4章讨论

第5章结论

参考文献

附录

致谢

原创性声明