MMP-9 DNA甲基化变化在ApoE-/-小鼠肾脏中的作用及高蛋氨酸饮食的影响

摘要

目的 探讨基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)DNA甲基化变化在载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)C57BL/6J小鼠肾脏中的作用及高蛋氨酸饮食的影响.方法 将ApoE-/-小鼠随机分成模型组、高蛋氨酸组和叶酸及维生素B12治疗组,并设正常C57BL/6J小鼠为正常对照组,喂养14周后采血,分离肾脏.全自动生化分析仪检测血清同型半胱氨酸(Hcy)、尿素(Urea)和肌酐(Cr)水平；免疫组织化学法分析肾脏MMP-9蛋白表达；荧光定量RT-PCR检测MMP-9 mRNA表达；巢式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)和降落式PCR检测MMP-9 DNA甲基化变化程度.结果模型组血清Hcy、Urea、Cr浓度均明显升高,MMP-9甲基化程度降低,mRNA和蛋白表达增强(均P＜0.05),与正常对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；高蛋氨酸组各项指标变化较模型组更为明显(均P ＜0.05)；而叶酸及维生素B12治疗组MMP-9 mRNA和蛋白表达减少,甲基化程度升高(P＜0.05).结论 MMP-9 DNA甲基化变化可能是ApoE-/-小鼠高蛋氨酸饮食致肾功能损伤的重要机制之一.