三维培养体系下Aurora-A激酶促乳腺永生细胞MCF-10A恶性转化及转移中的作用研究

摘要

目的：研究Aurora-A激酶对乳腺永生化细胞MCF-10A的恶性转化作用及转移能力的影响，初步探讨Aurora-A对三维培养体系下的乳腺永生化细胞的影响；为深入认识Aurora-A激酶的作用、三维培养体系在肿瘤研究的作用提供一定的证据。 方法：用逆转录病毒法转染MCF-10A细胞株，通过药物筛选，获得稳定高表达Aurora-A的MCF-10A细胞株，用Western印迹法检测Aurora-A表达情况。用细胞计数法检测Aurora-A高表达对MCF-10A细胞生长的影响；用间接免疫荧光法在激光共聚焦显微镜下观察三维培养体系中Aurora-A高表达对MCF-10A细胞增殖、凋亡的影响；观察细胞极性变化；用迁移实验研究Aurora-A对MCF-10A细胞迁移能力的影响。 结果：用逆转录的方法通过药物筛选，我们获得了稳定高表示Aurora-A的MCF-10A细胞株；用细胞计数和间接免疫荧光法都证实Aurora-A激酶在二维和三维培养体系中都促进MCF-10A细胞的增殖；在三维培养体系中Aurora-A对细胞凋亡也起促进作用；但Aurora-A对MCF-10A细胞的增殖作用较凋亡作用明显。高表达Aurora-A可以改变三维培养体系中的乳腺细胞极性，上皮细胞的极性蛋白分子表达分布发生改变，细胞间的粘附力减弱，细胞的迁移能力增强。 结论：Aurora-A激酶有促进乳腺永生化细胞MCF-10A增殖的作用，在三维培养体系中Aurora-A促增殖和促凋亡作用是同时存在的，而且促增殖的作用较促凋亡的作用强。高表达Aurora-A可以破坏三维培养体系中的细胞极性，上皮细胞的极性蛋白分子表达分布发生异常，细胞间的粘附力减弱，细胞的迁移能力增强。总之，三维培养体系下Aurora-A激酶促乳腺永生细胞MCF-10A恶性转化及转移中的作用。

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