促性腺激素释放激素类似物抗前列腺癌的生物学效应及其作用机制

摘要

前列腺癌是威胁男性健康的常见肿瘤之一,发病率占男性肿瘤的第二位。流行病学资料显示前列腺癌发病具有显著的地区差异。虽然与发达国家相比,中国仍是前列腺癌的低发国家。但是随着中国人口老龄化及生活条件的改善,发病率有明显增加的趋势,发病率稳步升高。 促性腺激素释放激素类似物(GnRH-a)用于治疗前列腺癌,在前列腺癌的治疗中掀起了一场革命。其药理作用在于当连续非脉冲式应用GnRH-a类似物时.可以使垂体前叶细胞的GnRH受体敏感性下降或受体数量减少(降调节),细胞表面受体数目减少使细胞对GnRH刺激的敏感性下降从而使LH的合成及分泌减少,进而使睾酮分泌减少,导致细胞的增殖受到抑制和雄激素依赖型细胞发生凋亡,最后使前列腺退化。同时GnRH类似物明显降低血清中前列腺特异抗原(PSA)浓度,对前列腺上具有明显抑制作用。尽管大多数患者对雄激素阻断治疗有效。但是绝大多数雄激素敏感性前列腺癌患者在接受去势治疗后平均12-18个月出现前列腺癌病灶的再次旺盛生长,生速度明显加快,并发生全身广泛转移。此时,前列腺癌已变为雄激素非依赖性。对于雄激素非依赖性前列腺癌的治疗目前仍是一个非常棘手的问题,也是国内外前列腺癌研究的热点问题。 近几年的研究发现：促性腺激素释放激素类似物(GnRH-a)对前列腺癌的治疗作用是通过前列腺癌细胞上的特异性GnRH受体实现的。前列腺癌细胞表达高水平的GnRHR,故GnRH类似物的显著抗增生效应。促性腺激素释放激素类似物(GnRH-a)具有抗人原发性前列腺癌细胞系增生的效应,癌细胞的生长可被抑制50％以上,并且最近有研究者报道促性腺激素释放激素类似物(GnRH-a)不会影响男性激素的正常代谢。这表明促性腺激素释放激素类似物(GnRH-a)应用于前列腺癌的临床治疗具有广阔应用前景。 本文为了探讨促性腺激素释放激素类似物(GnRH-a)抗人前列腺癌DU-145细胞生物学效应及其可能的作用机制。采用四唑蓝快速比色法(MTT法)观察GnRH-a对前列腺癌DU-145细胞增殖的影响；应用流式细胞术检测前列腺癌DU-145细胞周期及凋亡；通过半定量RT-PCR、细胞免疫组织化学方法观察GnRH-a.对前列腺癌DU-145细胞Survivin mRNA基因表达和蛋白表达水平。实验结果表明：(1) MTT显示GnRH-a可明显抑制前列腺癌DU-145细胞增殖,并随着浓度增加和作用时间的延长而增强(P＜0.05);(2) 流式细胞术检测显示GnRH-a作用的前列腺癌DU-145细胞中G0/G1期细胞比例下降,S期细胞比例上升(P＜0.05);(3) 免疫细胞化学法和半定量RT-PCR显示GnRH-a可使前列腺癌DU-145细胞中Survivin蛋白表达和基因表达较对照组明显减弱(P<0.05)。因此推论：(1) 促性腺激素释放激素类似物(GnRH-a)可明显抑制前列腺癌细胞增殖,且呈时间-剂量依赖性。(2) 促性腺激素释放激素类似物(GnRH-a)通过阻滞前列腺癌细胞周期,抑制抗凋亡蛋白Survivin表达,导致细胞凋亡,从而具有抗前列腺癌的生物学效应。

目录

论文说明:缩略语表

前言

材料与方法

结果

一、GnRH-a对人前列腺癌细胞DU-145生长的影响

二、GnRH-a对人前列腺癌癌细胞株DU-145细胞周期的影响

三、GnRH-a对人前列腺癌癌DU-145细胞凋亡率的影响

四、GnRH-a对人前列腺癌细胞DU-145中Survivin mRNA表达的影响

五、GnRH-a对前列腺癌DU-145中Survivin-蛋白表达的影响

讨论

结论

参考文献

综述 GnRH类似物的临床应用进展

附件

致谢