南海红树林放线菌的分离、活性筛选及次级代谢产物的研究

摘要

红树林生长于热带或亚热的海岸潮间带，拥有丰富而独特的微生物资源。红树林放线菌作为红树林微生物的重要一员，其次级代谢产物结构新颖，是新活性先导化合物的重要来源。本文对南海红树林放线菌的分离、活性筛选及次级代谢产物进行了研究。 ⑴采集了珠海、深圳、惠州以及阳江的莲北村、红光村、北津村等6个地点的红树林植物根际土壤样品，采用高氏一号培养基进行了放线菌分离；共分离得到177株放线菌。 ⑵以耻垢分枝杆菌（Mycobacterium smegmatis）做应试菌株，以滤纸片扩散法对所得到得放线菌作抗结核菌活性筛选，结果得到活性菌株44株，占总菌株数的24.68％。 ⑶对HS-11和V-65这两株放线菌株都进行了100L规模的液态发酵培养，发酵液采用乙酸乙酯液-液萃取，经硅胶柱层析、Sephadx LH-20凝胶柱、ODS反相硅胶柱等分离纯化进行了次级代谢产物研究，根据单体化合物的核磁共振，质谱，红外光谱，紫外光谱等波谱数据，进行了结构推导。结果从菌株HS-11发酵液乙酸乙酯粗体物中，成功分离鉴定了5个化合物的结构，其中M132为新蒽醌类化合物，7-（5-（（E）-but-2-enyl）-2，5-dihydro-4-hydroxy-5-methyl2-oxofuran-3-yl）-1-hydroxy-6-methylanthracene-9，10-dione。其余4个已知化合物分别为：β-羟基十五烷酸、1’-十四烷酸甘油单酯、对羟基苯甲酸、N-乙酰酪胺。在菌株V-65的菌体甲醇提取物中分离了1个化合物V-65-7-14，根据波谱数据初步推导其结构为灵菌红素类化合物，经文献检索为新化合物，但其结构还需进一步验证。

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第一章前言

1.1红树林微生物的研究进展

1.2放线菌的研究进展

1.3本论文的目的和意义

1.4本论文的研究思路

第二章 红树林土壤放线菌的分离

2.1引言

2.2结果与分析

2.3实验材料及仪器

2.4实验方法

2.5小结与展望

第三章抗结核活性的初筛

3.1引言

3.2结果与分析

3.3实验材料与仪器

3.4实验方法

3.5小结与展望

第四章菌株HS-11次级代谢产物的研究

4.1引言

4.2化合物结构解析

4.3实验材料及仪器

4.4实验方法

4.5化合物的波谱数据

第五章菌株V-65次级代谢产物的研究

5.1引言

5.2化合物V-65-7-14结构解析

5.3实验材料及仪器

5.4实验方法

第六章总结

参考文献：

致谢

附图