同源异型盒基因HOXB7在卵巢恶性生殖细胞肿瘤中的表达研究及其临床意义

摘要

目的：卵巢恶性生殖细胞肿瘤多发于年轻妇女和儿童，其发病率仅次于上皮性卵巢癌，生长迅速，恶性程度高，预后差。卵巢恶性生殖细胞肿瘤是一组特殊的性腺肿瘤，起源于胚胎性腺的原始生殖细胞，具有多种不同的组织学类型，常见的类型有卵黄囊瘤、未成熟畸胎瘤、混合性恶性生殖细胞肿瘤及无性细胞瘤。目前，虽有AFP等相关分子标志物运用于临床，指导其诊断及预后评价，而且30年来卵巢恶性生殖细胞肿瘤的治疗效果及总体生存不断改善，但现有的证据还不足以解释卵巢恶性生殖细胞肿瘤的发病机制。因此，从分子水平寻找新的肿瘤标志物，探究其癌变机制，仍具有十分重要的意义。同源异型盒基因(homeobox genes)是一类重要的发育调节基因，它编码转录因子家族，在胚胎发育过程中发挥重要作用。作为胚胎发育主控基因的HOX基因的表达异常还与妇科肿瘤的发生相关。其中HOXB7在乳腺癌、卵巢癌中均呈高表达且与肿瘤的分级、分化有关，它的激活与肿瘤增生、分化、血管生成、侵袭等密切相关。但是，目前HOXB7在卵巢恶性生殖细胞肿瘤中的表达及其与各临床病理因素及预后的关系尚不清楚。因此，本实验旨在分析HOXB7在卵巢恶性生殖细胞肿瘤中的表达及其与临床病理因素及预后的关系，探讨同源异型盒基因HOXB7在卵巢恶性生殖细胞肿瘤发生发展过程中的作用。
　　 方法：用RT-PCR、Real-time PCR和Western blot方法检测同源异型盒基因HOXB7在卵巢恶性生殖细胞肿瘤、正常卵巢组织及卵巢良性生殖细胞肿瘤中mRNA和蛋白水平的表达，并比较其在以上三种不同类型组织中的表达差异；用免疫组化的方法检测卵巢恶性生殖细胞肿瘤常见类型卵黄囊瘤、未成熟畸胎瘤、混合性恶性生殖细胞肿瘤及无性细胞瘤组织中HOXB7的表达，并采用统计学方法分析HOXB7的表达与各临床病理因素及生存预后的关系。
　　 结果：卵巢卵黄囊瘤、未成熟畸胎瘤及混合性恶性生殖细胞肿瘤组织中，HOXB7在转录和翻译水平均较正常卵巢组织高表达RT-PCR，Real-time PCR，Western blot和免疫组化结果显示：在转录和翻译水平，卵巢恶性生殖细胞肿瘤中，卵黄囊瘤中HOXB7的表达比正常卵巢组织明显增高；未成熟畸胎瘤中HOXB7的表达较正常卵巢组织和成熟畸胎瘤增高；混合性恶性生殖细胞肿瘤中HOXB7的表达比正常卵巢组织增高，尤以混合有卵黄囊瘤成分明显，无性细胞瘤中HOXB7表达与正常卵巢组织无差异。⑵卵巢恶性生殖细胞肿瘤中，HOXB7高表达组患者的3年生存率低于低表达组本组85例卵巢恶性生殖细胞肿瘤中，HOXB7的强阳性表达率为28.2％。HOXB7低表达组患者的3年生存率为78.7％，明显高于HOXB7高表达组的3年生存率(45.8％)，且统计学上具有显著性差异(Log-Rank检验，P=0.003)。⑶卵巢卵黄囊瘤、未成熟畸胎瘤中，HOXB7高表达组患者的3年生存率低于低表达组HOXB7低表达组的卵黄囊瘤患者3年生存率为90.9％，高于HOXB7高表达组的3年生存率(11.1％)，且统计学上具有显著性差异(Log-Rank检验，P=0.001)。HOXB7低表达组的未成熟畸胎瘤患者的3年生存率为76.9％，高于HOXB7高表达组的3年生存率(61.5％)，但统计学上无显著性差异(Log-Rank检验，P=0.302)。HOXB7在卵巢恶性生殖细胞肿瘤中的高表达与FIGO分期、AFP值和肿瘤复发呈正相关。
　　 结论：①在转录和翻译水平HOXB7在正常卵巢组织、成熟畸胎瘤、未成熟畸胎瘤、混合性恶性生殖细胞肿瘤、卵黄囊瘤中的表达不同程度升高，提示HOXB7的表达可能与卵巢恶性生殖细胞肿瘤的病理类型相关。②HOXB7的表达水平与卵巢恶性生殖细胞肿瘤患者，尤其是卵黄囊瘤患者的生存预后及复发相关。③HOXB7的高表达与卵巢恶性生殖细胞肿瘤患者的FIGO分期、AFP值呈正相关。④HOXB7可能参与了卵巢恶性生殖细胞肿瘤的癌变过程，在其发生发展过程中起一定的作用。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章 引言

第二章 材料和方法

一.实验对象

二.逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)

三.实时荧光定量PCR(Real-time PCR)

四.Western免疫印迹试验(Western blot)

五.免疫组织化学

第三章 结果

第四章 讨论

同源异型盒基因HOXB7结构和功能

HOX基因的表达与妇科肿瘤的关系

HOXB7基因的表达与MOGCT的关系

HOXB7基因的表达与MOGCT生存预后及复发的关系

HOXB7基因的表达与MOGCT临床病理因素的关系

第五章 结论

第六章 问题和展望

参考文献

附录

致谢