膳食n-6/n-3脂肪酸比值与IL-6基因多态性对动脉粥样硬化危险因素的影响及交互作用

摘要

本研究以AS炎症机制为切入点，重点研究n-6/n-3脂肪酸比值和IL-6基因多态性对血压、血脂及颈动脉IMT的独立作用和交互作用，探讨膳食脂肪酸通过调节炎症反应防止AS的可能机制，从而为其易患人群和普通人群的主要易患因素的早期筛选、预防、监测及制订早期的膳食干预措施提供理论依据，为营养与慢性病的研究提供基础资料和分子流行病学的资料积累。
　　 研究目的：
　　 1确定广州地区40～65岁人群膳食n-6/n-3脂肪酸比值与AS危险因素的关系。
　　 2探讨IL-6基因多态性与AS危险因素的关系。
　　 3探讨膳食及红细胞膜n-6/n-3脂肪酸比值与IL-6基因多态性对AS危险因素的交互作用。
　　 研究对象与方法：
　　 研究设计
　　 本研究为一项横断面调查，在广州市两个社区招募40～65岁居民约1000人，以志愿者的形式参与调查。
　　 研究对象
　　 研究对象纳入标准为：年龄40～65岁；无甲状腺功能异常、糖尿病、严重肥胖及其它严重的代谢性疾病，无心血管、肾脏、肝脏等其他系统的严重疾病；未服用影响血脂代谢的药品和保健品；无知晓的血压、血脂异常。
　　 膳食评价
　　 使用量化的食物频数问卷调查研究对象过去1年的饮食情况。
　　 指标检测
　　 标准方法检测身高、体重、血压等。Hitachi7600-010 automatic analyzer检测血脂4项和血糖；使用Technos MPX DU8型超声仪检测颈总动脉血管后壁内中膜厚度；用天根公司的全血基因组DNA提取试剂盒抽提基因组DNA，然后运用PCR-LDR技术检测IL-6-572位点基因多态性；用气相色谱仪检测红细胞膜脂肪酸构成。
　　 资料分析处理
　　 用Epidata3.0建立数据库，所有调查问卷均经双人重复录入数据库。
　　 数据库的膳食资料导为Excel表格，据“食物摄入量=摄入频率×每次进食量÷周期所含天数”计算日均食物摄入量，以g/d或ml/d的方式表示。根据《中国食物成分表2002》，“能量摄入量=食物摄入量×单位食物能量含量”，“营养素摄入量=食物摄入量×单位食物营养素含量”。每天的人均用油量根据“每月家庭总用油量÷30÷平均每天用餐人次”来计算；根据全年选用食用油的品种和构成比计算食用油提供的脂肪酸。
　　 实验数据用Microsoft Excel2003建立数据库，使用SPSS for Windows11.0进行统计分析，α=0.05。
　　 (1)计量资料的描述使用均数±标准差，计数资料使用百分比。
　　 (2)采用单因素协方差分析，分别比较不同膳食n-6/n-3脂肪酸比值、红细胞膜n-6/n-3脂肪酸比值及不同IL-6基因型对血压、血脂和颈动脉IMT影响的差异。校正性别、年龄及其他混杂因素后，采用协方差分析比较不同n-6/n-3脂肪酸比值和不同IL-6基因型之间对血压、血脂和颈动脉IMT的交互作用。
　　 (3)基因频率采用基因分数法计算，基因型是否符合Handy-Weinberg平衡定律及组间等位基因频率的差异比较采用x2检验。
　　 结果：
　　 1.基本情况
　　 本研究共1133人参与初筛，有995人进入研究。
　　 2.膳食能量及脂肪酸摄入
　　 3.红细胞膜脂肪酸构成比
　　 本研究共检测到16种红细胞膜脂肪酸，约占红细胞膜总脂肪酸的90％。与膳食中n-6和n-3多不饱和脂肪酸比值及构成不同，红细胞膜n-6/n-3 PUFA比值平均为(2.71±0.98)：1。此外，n-3多不饱和脂肪酸构成存在男女差异，男性的红细胞膜ALA和DHA构成比显著高于女性；而女性的红细胞膜EPA和DPA构成比高于男性。
　　 4.血压、血脂及颈动脉IMT水平
　　 研究对象中，男性对象的舒张压，TG显著高于女性对象。
　　 5.IL-6-572C/G基因型及等位基因分布频率
　　 IL-6启动子区域-572位点基因分布符合Hardy-Weinberg平衡，C等位基因的出现频率是0.771，G等位基因的出现频率0.229。各基因型年龄，BMI，吸烟状况，饮酒状况，膳食脂肪酸摄入量及红细胞膜脂肪酸构成比组间无显著差异。
　　 6.膳食脂肪酸摄入量与红细胞膜脂肪酸构成的相关性分析
　　 膳食脂肪酸摄入量与红细胞膜脂肪酸构成的简单相关分析结果显示，膳食n-3 PUFA摄入量与红细胞膜n-3 PUFA构成比以及膳食n-6/n-3脂肪酸比与红细胞膜n-6/n-3脂肪酸构成比均呈显著正相关，相关系数分别为0.174和0.129。膳食ALA，EPA及DHA摄入量与红细胞膜ALA，EPA及DHA构成比均呈显著正相关，相关系数分别为0.231，0.255及0.337。
　　 7.n-6/n-3脂肪酸比值与AS危险因素
　　 按三等分法将膳食n-6/n-3脂肪酸比值分成高、中、低3个水平组进行比较分析。采用协方差分析校正年龄、性别、BMI、吸烟、饮酒状况，膳食能量摄入后，比较n-6/n-3脂肪酸比值大小对血压、血脂及IMT水平的影响，结果显示膳食n-6/n-3脂肪酸比值越高，其收缩压、TC和IMT水平就越高，线性趋势显著。而舒张压、HDL、LDL及TG未见上述线性趋势。
　　 按三等分法将红细胞膜n-6/n-3脂肪酸比值分成高、中、低3个水平组进行比较分析。采用协方差分析校正年龄、性别、BMI、吸烟、饮酒状况、膳食能量摄入后，比较红细胞膜n-6/n-3脂肪酸比值大小对血压、血脂及IMT水平的影响。结果显示，红细胞膜n-6/n-3脂肪酸比值越高，血压、TC和IMT水平则越高，线性趋势显著。LDL协方差分析结果显示组间差异显著，两两比较发现，红细胞膜n-6/n-3脂肪酸比值中组和高组的LDL水平均高于比值低组，差异有统计学意义。
　　 8.IL-6-572C/G基因多态性与AS危险因素
　　 采用单因素协方差分析发现，两基因型组间TG、HDL水平不存在差异；而血压、TC、LDL及IMT水平两个基因型组间差异显著，即C/C纯合子个体的血压、TC、LDL及IMT水平均高于G等位基因携带者。
　　 9.n-6/n-3脂肪酸比值与IL-6-572C/G基因多态性对AS危险因素的交互作用
　　 膳食n-6/n-3脂肪酸比值与IL-6-572C/G基因多态性对血压和IMT水平存在交互作用。就血压而言，G等位基因携带者的膳食n-6/n-3脂肪酸比值越高，收缩压和舒张压的水平则越高，线性趋势显著，而C/C纯合子组，不同膳食n-6/n-3脂肪酸比值组的血压水平的差异无统计学意义。当膳食n-6/n-3脂肪酸比值为中或低水平时，两个基因组间的收缩压和舒张压的差异均具有统计学显著性，即G等位基因携带者的收缩压和舒张压均显著低于C/C纯合子个体。就IMT而言，C/C纯合子个体膳食n-6/n-3脂肪酸比值越高，IMT水平则越高，线性趋势显著，而G等位基因携带者，不同膳食n-6/n-3脂肪酸比值组的IMT水平差异无统计学意义。膳食n-6/n-3脂肪酸比值分别为高、中或低水平时，两个基因组间的IMT水平的差异具有统计学显著性，即C/C纯合子个体的IMT显著高于G等位基因携带者。
　　 红细胞膜n-6/n-3脂肪酸比值与IL-6-572C/G基因多态性对血压、LDL及IMT水平存在交互作用。对于血压和LDL，G等位基因携带者红细胞膜n-6/n-3脂肪酸比值越高，血压和LDL水平则越高，线性趋势显著，而C/C纯合子组，不同红细胞膜n-6/n-3脂肪酸比值各组的血压水平的差异无统计学意义。红细胞膜n-6/n-3脂肪酸比值分别为中或低水平时，两个基因组间的收缩压和舒张压的差异均具有统计学显著性，即G等位基因携带者的收缩压和舒张压均显著低于C/C纯合子个体。对于IMT，C/C纯合子组中红细胞膜n-6/n-3脂肪酸比值越高，IMT水平则越高，线性趋势显著，而G等位基因携带者，不同红细胞n-6/n-3脂肪酸比值组的IMT水平的差异无统计学意义。红细胞膜n-6/n-3脂肪酸比值分别为高、中或低水平时，两个基因组间的IMT水平的差异具有统计学显著性，即C/C纯合子个体的IMT显著高于G等位基因携带者。
　　 结论：
　　 1、广州市40～65岁居民膳食n-6/n-3脂肪酸比值平均约为30∶1；该比值＜17.40∶1的人群有较低的血压，TC及IMT。
　　 2、广州市40～65岁居民IL-6-572C/G基因多态性，C等位基因的出现频率是0.771，G等位基因的出现频率0.229。
　　 3、与G等位基因携带者相比，C/C纯合子个体具有较高的血压、TC、LDL及IMT水平，提示C/C纯合子个体罹患AS的风险可能较高。
　　 4、膳食及红细胞膜n-6/n-3脂肪酸比值与IL-6-572C/G基因多态性对血压、LDL及IMT水平存在交互作用。即膳食n-6/n-3脂肪酸比值＜17.40∶1可改善G等位基因携带者的血压及LDL水平以及改善C/C纯合子个体的IMT水平，从而降低其罹患AS的风险。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：主要中英文缩略语

声明

第1章 前言

1.1膳食脂肪酸对心血管疾病及其危险因素的影响

1.2膳食脂肪酸的摄入评价

1.3炎症反应是动脉粥样硬化核心的发病机制

1.4 IL-6基因多态性对AS危险因素的影响

1.5本课题提出依据

第2章 对象和方法

2.1研究对象

2.2实验设备和试剂

2.3研究内容与方法

2.4资料统计处理

第3章 结果

3.1研究对象的一般情况

3.2膳食脂肪酸摄入情况

3.3红细胞膜脂肪酸构成比情况

3.4血压、血脂及颈动脉IMT水平

3.5 IL-6-572C/G基因型及等位基因分布频率

3.6膳食脂肪酸摄入量与红细胞膜脂肪酸构成的相关性分析

3.7膳食n-6/n-3脂肪酸比值与AS危险因素

3.8红细胞膜n-6/n-3脂肪酸比值与AS危险因素

3.9 IL-6-572C/G基因多态性与AS危险因素的关系

3.10膳食n-6/n-3脂肪酸比值与IL-6-572C/G基因多态性对AS危险因素的交互作用

3.11红细胞膜n-6/n-3脂肪酸比值与IL-6-572C/G基因多态性对AS危险因素的交互作用

第4章 讨论

4.1 n-6/n-3脂肪酸比值与AS危险因素

4.2 n-6/n-3脂肪酸比值与IL-6-572C/G基因多态性对AS危险因素的交互作用

4.3课题的局限性与进一步研究方向

第5章 结论

参考文献

致谢