CDX在贲门肠化生及异型增生中的表达及意义

摘要

背景与目的：
　　贲门癌（Gastric Cardiac Carcinoma，GCC）在我国发病率一直呈现上升态势，生存率低且预后差。其发生部位于食管鳞状上皮和胃腺上皮的交界处，因解剖位置特殊，发病机制、流行病学与和胃癌均有所不同，现在一般将其作为一种独立的肿瘤进行研究。目前研究表明贲门癌的发生发展过程涉及多种等位基因的获得或缺失、抑癌基因甲基化以及许多基因和蛋白表达的改变，Correa模式（正常贲门组织→慢性浅表性贲门炎→慢性萎缩性贲门炎→肠上皮化生→上皮内瘤变→浸润性腺癌）是目前很多学者比较认同的贲门癌发生发展模型。但很多学者认为肠上皮化生是机体的一种自我保护机制，同时又普遍认为上皮内瘤变是一种癌前病变。然而，亦有学者提出肠上皮化生不是贲门癌变的必经阶段。CDX1和CDX2被认为是正常肠上皮的特异性分子标记，是调控肠道发育分化的重要分子。现已普遍被认为是肠上皮化生的分子标志物。
　　本研究在有明显杯状细胞的贲门异型增生组织及无明显杯状细胞的贲门异型增生组织中，观察不同炎症等级在贲门粘膜癌前病变的分布以及 CDX1、CDX2的表达情况，利用AB-PAS特殊染色与免疫组化结合的方法观察肠上皮化生分子标记与粘液分泌形态的表达。探讨在贲门癌变的过程中异型增生与肠上皮化生的演化关系。
　　材料与方法：
　　标本来源：
　　本次研究共收集90例食管癌患者手术切除标本中的贲门粘膜上皮组织，全部来自2010年至2012年汕头肿瘤医院术前未经放化疗病人的手术切除食管癌带部分正常近端胃组织标本。取材部位均跨越食管-胃交界处，组织学上均可观察到鳞-柱状上皮交界。经HE染色后，通过组织病理学观察90例贲门非癌组织标本分三组：正常贲门组织30例、具有明显杯状细胞的贲门异型组织30例、未见明显杯状细胞的异型增生组织30例。且均伴有不同程度的慢性炎症反应。
　　方法：
　　1. HE染色：观察贲门组织的病理形态及炎症等级。
　　2. AB-PAS特殊染色：判定贲门粘膜腺体粘液的性质。
　　3. IHC:对贲门组织进行CDX1、CDX2免疫组化染色，观察两个指标的表达情况。
　　4. IHC和AB-PAS套染：观察CDX1、CDX2检测贲门肠化生组织的特异性。
　　5.统计分析：采用SPSS对实验结果进行统计分析。
　　结果：
　　1.90例贲门非癌组织标本（正常贲门组织30例；有典型杯状细胞的异型组织30例；未见典型杯状细胞的异型增生组织30例）均伴有不同程度的慢性炎症反应。按炎症细胞浸润程度将炎症等级分为三组（正常贲门组织13例；轻度炎症19例；中-重度炎症58例），进行慢性炎症等级与贲门上皮组织增生级别的相关性分析后发现：随着炎症程度的加重，贲门粘膜上皮增生越明显，贲门粘膜慢性炎症程度和肠上皮化生、异型增生呈明显正相关（rs=0.604，P<0.001）。
　　2. CDX蛋白在有明显杯状细胞的异型增生组织中呈高表达（阳性率为100％），且CDX2的表达结果更敏感。CDX1和CDX2在部分未见明显杯状细胞的异型增生标本中也呈阳性表达（CDX1:17%,5/30；CDX2:53%,16/30），表明这部分未见明显杯状细胞的异型增生标本也可能与肠腺化生有关。
　　结论：
　　1.潮汕地区贲门慢性炎症等级与肠上皮化生和异型增生呈正相关，提示长期的慢性炎症刺激可能诱发贲门癌变。
　　2.部分未见明显杯状细胞的贲门异型增生标本表达肠上皮细胞标记（CDX1:17%,5/30；CDX2:53%,16/30），提示肠上皮化生是贲门癌变过程中的主要事件。

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第一章 前言

第二章 材料与方法

2.1 材料

2.1.1 标本来源

2.1.2 主要仪器设备

2.1.3主要试剂

2.1.4主要溶液配制

2.2 方法

2.2.1免疫组化玻片制备

2.2.2石蜡标本制备

2.2.3 HE染色

2.2.4 AB-PAS染色

2.2.5免疫组织化学染色

2.2.6 免疫组化与AB-PAS组化套染

2.2.7 石蜡切片免疫荧光

2.2.8 Quantitative real time-PCR \(Real time qPCR\)

2.2.9统计分析

第三章 结果

3.1 贲门慢性炎症程度与上皮增生程度呈正相关

3.2 CDX蛋白在部分未见典型杯状细胞的异型增生组织中呈阳性表达

第四章 讨论

4.1 贲门癌的发生发展过程

4.2 CDX1及CDX2与肠上皮化生的关系

4.3 问题与展望

第五章 结论

参考文献

综述: 尾侧型同源转录因子与肿瘤研究进展

致谢

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