新肿瘤睾丸抗原TEX19在膀胱癌中的表达研究

摘要

目的:肿瘤睾丸抗原由于其表达特征和高免疫原性，被认为是肿瘤免疫治疗的理想靶点。在本实验中我们分析和鉴定TEX19是在膀胱癌中的一个新肿瘤睾丸抗原。
　　方法:采用RT-PCR分析TEX19 mRNA在21例正常成人多器官组织、40对膀胱癌和癌旁组织、6株膀胱癌细胞株中的表达特点。采用qRT-PCR定量分析TEX19 mRNA在40对膀胱癌和癌旁组织中的表达特点。采用western blotting分析TEX19蛋白在4对膀胱癌和癌旁组织、6株膀胱癌细胞系中的表达特点。采用免疫组织化学实验分析TEX19蛋白在多器官正常组织、4对膀胱癌和癌旁组织、膀胱癌组织芯片中的表达特点。运用统计学方法分析TEX19的阳性表达与膀胱癌病例临床特点之间的关系。
　　结果: TEX19 mRNA及蛋白显著地表达在人睾丸组织，其蛋白定位在支持细胞的胞浆中。另外，TEX19 mRNA在60％（24/40）膀胱癌中表达，而其蛋白在58.20%（110/189）膀胱肿瘤中表达。与低级别膀胱肿瘤比较，TEX19蛋白在高级别肿瘤中表达明显增高。同时，TEX19在6株膀胱癌细胞株有不同程度的表达。
　　结论: TEX19是一个新的肿瘤睾丸基因，并可能在膀胱癌的发生、发展起着重要作用，成为膀胱癌免疫治疗的潜在靶点。

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第一章 前言

第二章 实验材料与方法

2.1 实验材料

2.1.1 患者组织标本

2.1.2 膀胱癌细胞株

2.1.3 主要实验材料和试剂

2.1.4 主要溶液的配制

2.1.5 主要仪器和设备

2.2 实验方法

2.2.1 组织及细胞株总RNA提取

2.2.2 逆转录实验

2.2.3 引物设计及合成

2.2.4 PCR实验

2.2.5 实时荧光定量PCR实验

2.2.5 组织及细胞株总蛋白提取

2.2.6 Western blotting实验

2.2.7 免疫组化实验

2.3 统计学分析

第三章 结果

3.1 TEX19在正常组织中的表达

3.1.1 TEX19 mRNA在正常成人多器官组织中的表达

3.1.2 TEX19蛋白在正常成人睾丸组织的表达定位

3.1.3 TEX19蛋白在人多器官正常组织中的表达

3.2 TEX19在膀胱癌中的表达

3.2.1 TEX19 mRNA在膀胱癌中的表达

3.2.2 TEX19 mRNA表达与膀胱癌患者临床病理特征的关系

3.2.3 TEX19 蛋白在膀胱癌中的表达

3.2.4 TEX19 蛋白表达与膀胱癌患者临床病理特征的关系

3.3 TEX19在膀胱癌细胞株中的表达

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

附录 文献综述:肿瘤睾丸抗原在膀胱癌中的研究进展

致谢

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