5-羟色胺2A受体T102C基因多态性与卒中后抑郁的关联研究

摘要

研究背景：
　　 卒中后抑郁(post—stroke depression,PSD)指脑卒中后出现以情绪低落、兴趣减退等为主要表现的疾病,其临床特征包括抑郁、焦虑、兴趣减退、睡眠障碍、早醒、体重减轻等。患病率占脑卒中患者的25％～79％。PSD对脑卒中患者神经功能缺损及认知功能损害的恢复产生显著影响,是增加脑卒中后病死率及自杀率的潜在危险因素,并长期影响脑卒中患者生活质量,日益受到人们的关注。
　　 卒中后抑郁的发病机制目前尚未完全清楚,目前主要有以下三种机制。(1)从神经解剖机制讲,有研究认为左额叶和双颞叶局部血流低灌注与卒中后抑郁的发生有关。(2)从社会心理机制上讲,有学者认为卒中后家庭和社会的支持、经济状况、运动功能、参与家庭和社区活动能力的改变,以及就业能力的改变等均可导致患者心理平衡失调、产生抑郁。(3)从生物机制角度讲,PSD的发生与大脑损害后的神经生物学改变有关:因为去甲肾上腺素能和5-羟色胺能神经元胞体位于脑干,其轴突通过丘脑下部、基底节,环绕胼胝体和放射冠,最后到达额叶皮质。病灶累及以上部位时,可影响区域内的5-羟色胺能和去甲肾上腺素能神经通路,导致去甲肾上腺素和5-羟色胺含量下降而引起抑郁。大量研究均表明PSD的发生与5-HT系统异常有关.近年有学者利用正电子发射扫描(PET)对脑卒中患者的脑代谢进行研究,研究显示PSD患者脑内NA和5-HT神经递质水平下降的同时发现脑脊液中单胺类递质水平与抑郁程度成负相关。临床上应用选择性5-HT再摄取抑制剂(SSRI)和三环类抗抑郁药(TCA)可有效治疗PSD,其作用机制就是促进卒中后生物胺浓度恢复正常。
　　 5-羟色胺受体多而复杂,其中5-羟色胺2A受体(Serotonin-2A receptor,5-HT2AR)是与磷脂酶相关的G蛋白偶联受体,位于神经元突触后部,在中枢神经系统主要分布在带状核、嗅结节、海马、额叶皮质和梨状内嗅皮质等区域,在肝、脾等周围组织中也有分布。5-HT2AR是抑制性受体,其激活后会降低神经元兴奋性,其与人类多种精神活动密切相关,加之它参与多种精神药物的作用机制,所以在精神疾病研究中是一个重要的基因标志。人类5-HT2AR的遗传基因定位于第13号染色体长臂14—21区(13 q14—21)。目前共发现5-HT2AR有5种多态性,即2种静息多态性T102 C和C516 T,3种结构多态性Thr25 Asn、His452 Thr和Ala447 Val。多态性T102 C、Thr25 Asn均是位于第一外显子的第一部分。T(-102)C多态性位于非编码区,不能改变氨基酸序列,但是与其它的多态性位于同一连锁不平衡区。在5-HT2AR的T102C基因位点上,T等位基因如果突变为C等位基因,可以减少5-HT2AR的表达,从而使5-HT2AR结合力下降,5-HT2A受体激活减少,从而神经元的兴奋性提高。
　　 研究发现5-HT2A受体敏感性是重症抑郁症的状态指标,中枢5-HT2A受体结合力的变化在抑郁症的发生发展中起重要作用。对抑郁症患者尸检规模发现大脑皮质5-HT2A受体结合力增加,对抑郁症患者的外周血小板研究证明抑郁症患者外周血小板5-HT2A受体结合力高于正常对照组。有大量研究表明抗抑郁药物可降低卒中后抑郁患者中枢5-HT2AR的密度,会下调突触后5-HT2A受体,降低其对5-HT的亲和力,使抑郁症状好转。同时,有学者发现5-HT2AR基因T102C多态性可能与抑郁症的发病有关,其中C102等位基因可能是男性罹患抑郁症的保护因子。
　　 综上所述,PSD患者血5-HT含量与病情轻重有关,可将其作为反映PSD患者抑郁程度的指标,同时5-羟色胺2A受体T102C基因多态性与抑郁症有关。因此综合以上两点,我们认为5-HT2A受体基因多态性可能与PSD的遗传易感性有关。国内外对5-HT2A受体基因多态性与PSD之间关系的研究未见报导。
　　 目的:
　　 本实验目的在于探讨5-羟色胺2A受体T102C基因多态性与卒中后抑郁的关系,探明卒中后抑郁的遗传发病机制,为卒中后抑郁的临床诊断提供分子生物学指标。
　　 方法:
　　 采用病例对照研究,严格按照入组排除标准,选取脑卒中后抑郁症患者(PSD组)和脑卒中后无抑郁症患者(单纯脑卒中组)共169例,其中卒中后抑郁症患者(PSD)97例为研究对象,另外卒中后无抑郁症患者(单纯脑卒中组)72例为对照组。所有被试者抽全血2ml,EDTA抗凝,以酚-氯仿法提取基因组DNA。采用聚合酶链式反应(PCR)和限制性片断长度多态性(RFLP)技术,应用上游5’-TCT GCTACA AGT TCT GGC TT-3’和下游5’-CTG CAG CTT TTT CTC TAG GG-3’引物扩增5-羟色胺2A受体T102C等位基因,应用MspI内切酶检测T→C多态性。运用SPSS13.0统计软件包,采用卡方检验比较脑卒中后抑郁症患者与脑卒中后无抑郁症患者之间各种基因型和等位基因频率的差异是否有统计学意义。
　　 结果:
　　 单纯脑卒中组和卒中后抑郁组两组间性别构成比较差异无统计学意义(t=-0.873,P=0.350).单纯脑卒中组和卒中后抑郁组两组间年龄分布比较差异无统计学意义(x2=-1.263,P=0.208)。
　　 5-HT2A受体T102C基因多态性与卒中后抑郁的关系5-HT2AR T102C基因多态检测结果显示,在单纯脑卒中组野生型T、突变型C等位基因的频率分别为41.0％(59/144)、59.0％(85/144)；在卒中后抑郁组分别为56.7％(110/194)、43.3％(84/194)。经统计学处理差异有统计学意义(x2=8.179,P<0.05,OR=1.887,95％CI=1.219—2.921).卒中后抑郁组C等位基因频率(43.3％)低于单纯脑卒中组(59.09％)。5-HT2AR基因T102C位点各种基因型分布:野生纯合子A1/A1、杂合子A1/A2、突变纯合子A2/A2基因型的分布频率在单纯脑卒中组分别是16.7％(12/72)、48.6％(35/72)、34.7％(25/72)；在卒中后抑郁组分别是34.09％(33/97)、45.4％(44/97)、20.6％(20/97)。两组间各基因型的分布频率经统计学处理差异有统计学意义(x2=7.855,P<0.05)。
　　 结论:
　　 5.羟色胺2A受体T102C基因频率和基因型在单纯脑卒中组和卒中后抑郁组分布比较差异有统计学意义,提示5-羟色胺2A受体T102C基因多态性可能与卒中后抑郁的发病有关,5-HT2A受体T102C基因可能是卒中后抑郁的易感基因,C等位基因可能是罹患卒中后抑郁的保护因子。