摘要
前言
第一章 高渗盐水对原代小胶质细胞释放炎症因子的影响
1．实验目的
2．实验动物及材料
2．1 实验动物
2．2 实验材料
2．3 试剂准备
3．实验方弦
3．1 混合胶质细胞培养及小胶质细胞的获取
3．2 细胞实验中最佳缺氧时间及最佳HS浓度的筛选
3．3 免疫荧光实验检测小胶质细胞的纯度及炎症因子的表达
3．4 ELISA检测HS对小胶质细胞释放炎症因子的影响
3．5 统计方法
4．实验结果
4．1 原代混合胶质细胞培养
4．2 纯化后小胶质细胞的鉴定
4．3 各种浓度的HS、及不同缺氧时间对小胶质细胞释放炎症介质的影响
4．4 100mM HS对小胶质细胞释放炎症介贡的影响
5．讨论
6．结论
第二章 HS影响小胶质细胞释放炎症因子的机制
1．实验目的
2．实验动物及材料
2．1 实验动物
2．2 实验材料
2．3 试剂准备
3．实验方法
3．1 探讨小胶质细胞释放炎症介质与p38及JNK信号通路的关系
3．2 探讨HS对小胶质细胞中P-p38及P-JNK蛋白水平的影响
3．3 统计方法
4．实验结果
4．1 缺氧后各组细胞释放炎症因子的情况
4．2 缺氧条件下Hs对p38及JNK磷酸化的影响
5．讨论
6．结论
第三章 炎症因子TNF-α及IL-1β对星形胶质细胞表达NKCC1的影响
1．目的
2．实验试剂与材料
2．1 实验动物
2．2 实验材料
2．3 试剂准备
3．实验方法
3．1 星形胶质细胞的获取
3．2 免疫荧光检测星形胶质细胞上NKCC1的表达及鉴定星形胶质细胞纯度
3．3 western blot检测星形胶质细胞上NKCC1的表达
3．4 RT real-time PCR
3．5 统计方法
4．实验结果
4．1 TNF-α、IL-1β对星形胶质细胞上NKCC1 mRNA表达的影响
4．2 TNF-α、IL-1β对星形胶质细胞上NKCC1蛋白表达的影响
4．3 加入TNFR特异拮抗剂及IL-1R特异拮抗帮后TNF-α、IL-1β对星形胶质细胞上NKCC1 mRNA表达的影响
4．4 加入TNFR特异拮抗剂及IL-1R特异拮抗剂后TNF-α、IL-1β对星形胶质细胞上NKCC1蛋白表达的影响
5．讨论
6．结论
第四章 HS对星形胶质细胞上NKCC1的直接影响
1．目的
2．实验试剂及材料
2．1 实验动物
2．2 实验材料
2．3 试剂准备
3．实验方法
3．1 星形胶质细胞的纯化
3．2 星形胶质细胞的分组
3．3 免疫荧光检测星形胶质细胞上NKCC1的表达及鉴定星形胶质细胞纯度
3．4 western blot检测星形肢渥}细胞上NKCC1的表达
3．5 统计方法
4．实验结果
4．1 HS在缺氧条件下对星形胶质上NKCC1 mRNA表达的影响
4．2 HS在缺氧条件下对星形胶质上NKCC1蛋白表达的影响
5．讨论
6．结论
全文总结
参考文献
攻读学位期间发表的论文
致谢
声明
统计学证明
