非酒精性脂肪性肝病患者肠道菌群特点及肠道炎症研究

摘要

非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)是以肝脏过量脂肪浸润为病理特点的一种代谢性肝脏损伤，目前已成为最常见的慢性肝脏疾病。新近研究发现，肠道菌群失调与NAFLD的发生、发展相关。肠道菌群失调是导致肠道炎症的重要因素，而肠道炎症状态在NAFLD中的研究鲜见报道，肠道菌群失调与肠道炎症在NAFLD中的作用值得进一步探讨。
　　目的：
　　明确NAFLD患者肠道菌群结构特点及肠道炎症状态。
　　方法：
　　研究纳入2015年5月～2016年8月在南京军区南京总院门诊就诊的81例NAFLD患者，并选取同期本院体检中心91例体检者作为健康对照。收集入选对象的血清及粪便样品，分别进行血液生化学检测及粪便钙卫蛋白(fecal calprotectin，FC)检测(ELISA法)。此外，其中的24例NAFLD患者及18例对照者的粪便样品进行16SrRNA测序。两组间比较采用独立样本的T检验，计数资料采用X2检验。采用Spearman法进行相关性分析，采用Logistic回归进行多因素分析。统计分析采用SPSS20.0软件进行分析，P＜0.05为差异有统计学意义。
　　结果：
　　1.一般情况：NAFLD组的体质指数(BMI)、腰围、尿酸、血糖、AST、ALT、GGT、TC、TG及LDL的水平均明显高于健康对照组;NAFLD组HDL的水平低于健康对照组;多因素分析发现TG、TC、HDL及BMI是NAFLD发病的独立危险因子。
　　2.肠道菌群组成分析：厚壁菌门、拟杆菌门、变形菌门以及放线菌门是两组研究对象肠道中的四大优势菌门，其占细菌总量的95％以上。在细菌门分类学水平上，拟杆菌门在NAFLD组中的丰度(30.46％)低于健康对照组(46.43％)(P＜0.05)，变形菌门在NAFLD组的丰度(23.21％)高于健康对照组(7.99％)(P＜0.05)，NAFLD患者粪菌中变形菌门/拟杆菌门比值较健康对照组显著升高(P＜0.01)，厚壁菌门及放线菌门的丰度差异在两组间无统计学意义;在细菌科及属的分类学水平上，NAFLD组患者粪菌中拟杆菌科、拟杆菌属的丰度显著低于健康对照组(P＜0.01)，大肠杆菌科及埃希氏菌属的丰度则显著高于健康对照组(P＜0.01)，埃希菌属/拟杆菌属比值显著高于健康对照组(P＜0.01)。
　　3.FC检测：NAFLD组的FC平均浓度(43.0(18.8-87.0)μg/g)高于正常对照组(11.4(4.6-24.4)μg/g)(P＜0.001)。FC水平与BMI、TC及GGT的水平均具有相关性，相关系数分别为0.725(P＜0.001)、0.292(P=0.010)及0.400(P＜0.01)。
　　4.肠道菌群失调与FC相关性分析：FC浓度与埃希氏菌属的丰度呈正相关(r=0.644，P＜0.001)，与拟杆菌属的丰度呈负相关(r=-0.426，P=0.038)，与埃希菌属/拟杆菌属丰度的比值呈显著正相关（r=0.810，P＜0.001）。
　　结论：
　　NAFLD患者存在肠道炎症，以及以埃希氏菌属/拟杆菌属丰度比值升高为特征的菌群失调，二者之间存在良好的相关性。肠道菌群菌群失调及肠道炎症可能与NAFLD的发生发展相关。

目录

摘要

前言

一、概述

二、肠-肝轴与NAFLD

三、肠道菌群与NAFLD

四、肠道炎症与NAFLD

五、小结

一、引言

二、研究方法

1．研究设计及研究对象

2．一般资料的获取

3．标本收集、处理及检测

4．16SrRNA测序

5．粪便钙卫蛋白测定

6． 统计学分析

三、结果

1．患者临床资料

2．肠道菌群组成及多样性分析

3．FC含量测定

4．FC含量及与菌群丰度相关性分析

四、讨论

全文小结

参考文献

综述 肠道菌群在慢性肝脏疾病中作用的研究进展

中英文缩略词表

攻读学位期间发表论文

致谢

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