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尿液外泌体miRNA作为儿童特发性肾病综合征新型分子标志物的临床研究

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目录

摘要

第一章绪论

1.1外泌体简介

1.1.1外泌体的生物学特点

1.1.2外泌体的发现

1.1.3外泌体的形成与释放

1.1.4外泌体与靶细胞的作用方式

1.1.5外泌体的分离及鉴定

1.1.6外泌体的研究价值

1.2 miRNA研究背景

1.2.1 miRNA的发现及来源

1.2.2 miRNA的结构及生物合成

1.2.3 miRNA的作用机制及功能

1.3尿液外泌体miRNA与肾脏疾病

1.3.1 miRNA与肾脏疾病

1.3.2尿液外泌体与肾脏疾病

1.3.3尿液外泌体miRNA与肾脏疾病

1.3.4尿液外泌体miRNA在肾病综合征中的研究

第二章儿童特发性肾病综合征患者尿液外泌体miRNA的水平变化及临床意义

2.1 引言

2.2实验材料和方法

2.2.1研究对象与尿液标本收集

2.2.2实验所用仪器和试剂

2.2.3尿液外泌体的提取

2.2.4 纳米颗粒跟踪分析技术(NTA)鉴定外泌体

2.2.5尿液外泌体蛋白质提取

2.2.6蛋白免疫印迹检测外泌体标志性蛋白

2.2.7透射电子显微镜观察外泌体结构

2.2.8尿液外泌体RNA的提取

2.2.9 Illumina SBS测序技术

2.2.10 miRNA定量分析

2.2.11患者血液生化指标测定及24h尿蛋白定量

2.2.12数据统计分析

2.3实验结果

2.3.1尿液外泌体大小和浓度的鉴定

2.3.2尿液外泌体标志性蛋白表达鉴定

2.3.3尿液外泌体形态结构鉴定

2.3.4儿童特发性NS尿液外泌体miRNA的Illumina SBS测序结果

2.3.5尿液外泌体RNA提取重复性和标准曲线的稳定性

2.3.6儿童特发性NS尿液外泌体miRNA表达谱的复筛

2.3.7儿童特发性NS尿液外泌体miRNA表达谱的验证

2.3.8儿童特发性NS尿液外泌体中5种miRNA的ROC曲线分析

2.3.9尿液外泌体miRNA与儿童特发性NS的风险评估

2.3.10尿液外泌体miRNA在不同程度尿蛋白的NS患者中的表达

2.3.11尿液外泌体miRNA在NS患儿治疗前后的表达

2.3.12 5种miRNA在不同NS亚型患者尿液外泌体中的表达

2.3.13 5种尿液外泌体miRNA与儿童特发性NS患者肾功能相关参数的相关性分析

2.4讨论

全文小结

参考文献

英文缩略词注释

硕士期间获得成果

致谢

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