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miR--222/GAS5在替莫唑胺所致T98G细胞DNA损伤及细胞毒性中的作用及机制

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目录

摘要

第一章前言

1.1多形性胶质母细胞瘤的概述

1.2替莫唑胺在脑胶质瘤化疗中发挥的作用及机制

1.3脑胶质瘤对替莫唑胺的化疗耐药情况及相关机制

1.4 miRNAs参与脑胶质瘤对TMZ耐药过程

1.5 LncRNAs参与脑胶质瘤对TMz耐药过程

1.6研究目的及意义

第二章材料与方法

2.1实验设备及材料

2.1.1主要实验仪器与设备

2.1.2主要试剂与耗材

2.2细胞培养及药物处理相关试剂的配备

2.2.1低糖DMEM完全培养基的配置

2.2.2磷酸盐缓冲液溶液的配置

2.2.3 TAE溶液配置

2.2.4替莫唑胺应用液的配备

2.3实验方法

2.3.1 T98G细胞的培养

2.3.2 miR-222碱基序列查询及靶结合IncRNAs预测

2.3.3对T98G细胞进行miR-222 mimic及inhibitor的转染

2.3.4 CCK-8法检测细胞增殖情况

2.3.5细胞总RNA提取及质量鉴定

2.3.6实时荧光定量PCR测定mRNAs、miRNAs及IncRNAs的表达水平

2.3.7 CCK-8法检测替莫唑胺对各组细胞中的细胞毒性

2.3.8单细胞凝胶电泳法检测细胞中替莫唑胺诱导的DNA损伤反应

2.3.9数据统计及关联性分析

第三章结果

3.1转染后T98G细胞的形态变化

3.2 miR-222对T98G细胞的增殖能力的影响

3.3生物信息学分析miR-222序列及其靶基因的预测

3.4 T98G细胞中GAS5及MGMT的表达水平接受miR-222的调控

3.5替莫唑胺对各组T98G细胞的细胞毒性

3.6替莫唑胺对各组T98G细胞DNA损伤作用

3.7 miR-222/GAS5表达与TMz诱导的T98G DNA损伤反应、细胞毒性三者的相关性分析

第四章讨论

4.1 miR-222在替莫唑胺致脑胶质瘤细胞损伤中的作用及机制

4.2 miR-222/GAS5信号轴在替莫唑胺致脑胶质瘤细胞DNA损伤及细胞毒性中的作用及机制

4.3 miR-222/GAS5信号轴作为脑胶质瘤的药物治疗靶点的探讨

全文小结

参考文献

攻读学位期间成果

致谢

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