摘要
1研究背景
2.1 实验材料
2.1.1细胞系和弓形虫虫株
2.1.2实验试剂
2.1.3实验仪器
2.1.4主要试剂的配制
2.2 实验方法
2.2.1细胞系和弓形虫虫株的培养增殖
2.2.2外泌体分离
2.2.3用透射电子显微镜检测外泌体的形态
2.2.4通过纳米粒子追踪分析检测外泌体的大小和数量
2.2.5蛋白质印迹(Western,Blot,WB)
2.2.6用Q-PCR验证差异miRNA
2.2.7生物信息学分析
2.2.8流式细胞仪检测DC2.4细胞的凋亡水平
2.2.9 PKH67染色标记外泌体追踪实验
2.3 差异表达miRNA的筛选
2.3.1外泌体miRNA的测序
2.3.2差异表达miRNA的筛选方法
3实验结果
3.1 用RH-GFP感染评估弓形虫RH虫株对DC2.4的感染情况
3.2 外泌体的形态学鉴定
3.3 外泌体的蛋白质印迹鉴定和纳米颗粒追踪分析(NTA)
3.4 弓形虫感染和未感染的DC2.4细胞外泌体miRNA测序及差异miRNA分析
3.5 用Q-PCR验证差异表达的miRNA
3.6 预测和分析差异miRNA的靶基因
3.7 外泌体共培养凋亡检测实验
3.8 外泌体PKH67示踪实验
4讨论
5小结
参考文献
缩略词对照表
在校期间发表论文情况
致谢
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