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两种微型绿藻营养生理及原生质体制备与杂交育种的研究

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目录

一、 前言

二、 实验材料

三、 主要仪器

四、 实验方法

五、 实验结果

六、 结果讨论

七、 结论

八、 参考文献

致谢

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摘要

雨生血球藻(Heamatococcuspluvialis)与普通小球藻(Chlorellavulgaris)均为单细胞、光能自养的淡水绿藻。由于其具有较高的营养价值及高光能效应,近年来越来越受到人们的重视。从应用研究逐渐转向商业生产,同时藻种也需要进行必要的改进。以细胞融合为杂交育种手段,不失为一种简便、直接、快速的单细胞微藻育种方法。雨生血球藻与普通小球藻在营养生理上有着较大的差异。雨生血球藻不能够利用以尿素为氮源或者以醋酸盐为碳源的培养基;普通小球藻则可以充分地利用上述两种营养成分,并且在高盐浓度的培养基中迅速地生长。本文采用酶法制备雨生血球藻和普通小球藻的原生质体。根据细胞壁的差异,分别采用不同的酶及处理方法。雨生血球藻的原生质体制备选用了0.06%蛋白酶K,pH7.8,35℃处理1小时,最高可得到48.70%的原生质体形成率,以及在以聚乙二醇(PEG6000)为渗透压调节剂的再生平板上,原生质体再生率最高可达到60.32%。针对小球藻细胞壁结构的特殊性和多样性,进行了一系列的酶解条件实验。

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