大真眼点藻的油脂积累规律及其水溶性多糖的组成成分分析

摘要

大真眼点藻(Eustigmatos magnus)是真眼点藻纲的一株土壤藻。大量研究证实,氮胁迫能够促进微藻的油脂积累,但同时也会抑制藻细胞的生长,因此选择一种最适产油的氮浓度成为能源微藻研究的首要任务。此外,微藻多糖因其丰富的生物活性及结构多样性,在生物医学方面引起极大关注,通过对此类微藻高附加值产品的开发利用可适当降低生物柴油的成本。本实验以大真眼点藻为研究材料,BG-11为基础培养基,设置四种NaNO3浓度,利用?3 cm的玻璃柱状光生物反应器对该藻进行培养,在培养过程中观察了大真眼点藻的细胞形态变化、细胞繁殖方式,并测定了生物量、总脂含量、脂组分含量以及脂肪酸组成等指标,探究氮浓度对大真眼点藻生长和脂积累的影响,揭示了大真眼点藻的油脂积累规律;利用?4 cm的玻璃平板光生物反应器,以6 mmol/L作为培养基中NaNO3浓度,对大真眼点藻进行放大培养,测定了生物量、总脂含量、培养末期脂组分含量等指标,探究在较为粗放的培养条件下大真眼点藻是否仍然保持较高的油脂产率;利用脱脂藻渣提取水溶性多糖,经分离纯化后得到精多糖,对精多糖的糖苷键以及单糖组成进行分析研究。主要实验结果如下:
　　(1)最适宜大真眼点藻生物量积累的NaNO3浓度为9 mmol/L,生物量达到11.31 g/L;NaNO3浓度为3.6 mmol/L时,总脂含量为60.21％(干重百分比),中性脂含量为55.98%(干重百分比)(总脂百分比为92.99%);脂肪酸主要组分为棕榈酸、棕榈油酸和油酸,三者含量总和占总脂肪酸含量的55%~87%;9 mmol/L实验组的总脂单位体积产率最高为0.29 g/L/d,6 mmol/L实验组的中性脂产率最高,达到0.26 g/L/d。
　　(2)平板反应器培养条件下,大真眼点藻的生物量为4.91 g/L;总脂含量占藻粉干重的46.68%;第18天中性脂含量占藻粉干重的39.5%,占总脂含量的83.38%;第18天总脂单位体积产率为0.13 g/L/d,中性脂单位体积产率为0.11 g/L/d。
　　(3)粗多糖经过分离、纯化后得到3种精多糖。通过红外光谱分析发现,3种多糖的糖苷键均为α型;采用GC-MS法进行单糖组成分析,结果显示3种多糖均含有阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖这5种单糖,而 EM-1和EM-3还含有核糖和鼠李糖。其中EM-1中的主要组分为木糖和半乳糖,两者之和达到60%以上;EM-2中甘露糖、葡萄糖和阿拉伯糖含量较多,三者之和达到60%以上;EM-3中的主要组分为木糖,其含量达到50%以上,其它相对含量较多的有核糖及半乳糖。

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第一章 前言

1 微藻资源的开发和利用

2 微藻生物柴油

3 微藻多糖的提取、分离纯化和结构鉴定

4 本论文的研究内容和意义

第二章 大真眼点藻的油脂积累规律

1 实验设计

2材料与方法

3结果与分析

4讨论

5 结论

第三章 大真眼点藻的扩大培养

1实验设计

2材料与方法

3结果与分析

4讨论

5结论

第四章 大真眼点藻水溶性多糖的组成成分分析

1实验设计

2材料与方法

3结果与分析

4讨论

5 结论

参考文献

在校期间发表论文

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