水体高铜对红耳龟抗氧化能力及组织病理学的影响

摘要

铜是各种生物相当重要的微量元素之一，它参与构成生物体内的多种蛋白，而这些蛋白起着重要的生理作用。对于水生动物，水体中的铜会在水生动物体内发生富集，干扰正常的代谢，甚至会引发中毒。随着生产力的提升，土壤和水源的重金属污染日益严峻，而铜则是水体的主要污染物之一。此外水产养殖过程中硫酸铜的应用，也加剧了水体铜污染的程度。本论文研究目的是探究水体高铜对红耳龟(Trachemys scripta elegans)内脏器官抗氧化能力及组织病理学变化的影响，同时探究铜、铁、锌、锰在红耳龟组织中的含量和水体铜是否对红耳龟组织中铜、铁、锌、锰含量造成影响。
　　实验选取32只，健康2岁红耳龟，随机分成4组。设立4种铜浓度不同的水体，对照组采用双蒸水，实验组水体铜离子浓度分别为1mg/L、3mg/L和6mg/L。实验时间为8个月，实验结束后采用低温冷冻麻醉法和断头法处死红耳龟进行解剖采样，采集肝脏、心脏、肺脏、脾脏、肾脏、胰腺、胃、肠和肌肉9种组织。采集的组织一部分在10%中性福尔马林中固定，制作病理切片；一部分制作成10%组织匀浆做抗氧化能力指标检测，包括总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）和丙二醛（MDA）的检测；剩下的组织用于火焰原子吸收法检测铜（Cu）、铁（Fe）、锌（Zn）、锰（Mn）含量。
　　检测抗氧化能力的实验结果表明，水体高铜会令红耳龟抗氧化能力下降，但并不是所有组织都受到影响，主要受影响组织是肝脏、肾脏、胰腺和肠，总体表现为总抗氧化能力（T-AOC）下降，超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性下降和丙二醛（MDA）含量上升，其他组织的抗氧化指标未见显著变化。
　　组织病理切片显示水体高铜引起红耳龟肝脏、肾脏、胰腺和肠的病变，具体表现为肝细胞坏死、胰腺细胞水泡变性、肾小管单层立方上皮细胞水泡变性且部分细胞坏死、小肠绒毛细胞坏死脱落。病理切片表现损伤的组织与表现抗氧化能力下降的组织结果一致。
　　各组织铜含量：肝脏＞肠＞胃、肌肉、心脏和肾脏＞肺脏和胰腺，且随着水体铜浓度升高肝脏、胃、肠和肾脏的铜含量上升。
　　各组织铁含量：肝脏＞肠、肌肉、胃和肾脏＞心脏和肺脏＞胰腺。水体铜浓度升高对各组织的铁含量没有影响。
　　各组织锌含量：肝脏＞肾脏＞肌肉＞胃、肠、心脏和肺脏＞胰腺。水体铜浓度升高对各组织的锌含量没有影响。
　　各组织锰含量：肝脏＞胃、肾脏和肠＞心脏和肌肉＞肺脏和胰腺。水体铜浓度升高对各组织的锰含量没有影响。
　　结论：水体高铜降低红耳龟的抗氧化能力，引起肝脏、肾脏、胰腺和肠组织细胞变性坏死。红耳龟肝脏和肾脏铜、铁、锌、锰含量最高，随着水体铜浓度升高，肝脏、肾脏、胃、肠的铜含量升高，但铁、锌、锰含量不受影响。

目录

声明

英文缩写词表

1 前言

1. 1 红耳龟养殖市场现状

1. 2 水体重金属污染

1. 3 铜对机体的影响

1. 4 铜对机体其他微量元素的影响

1. 5 研究目的和意义

2 材料与方法

2. 1 实验动物

2. 2 实验动物分组与饲养

2. 3 主要仪器设备和实验材料

2. 4 样本采集与保存

2. 5 组织匀浆的制备

2. 6 考马斯亮蓝法蛋白定量测定

2.7 超氧化物歧化酶（SOD）的测定

2.8 总抗氧化能力（T-AOC）的测定

2.9 谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的测定

2.10 丙二醛（MDA）的测定

2 .11 组织石蜡切片的制备

2 .12 组织内铜、铁、锌、锰含量的测定

2 .13 数据统计与分析

3 实验结果

3 .1 红耳龟组织匀浆SOD活力的变化

3 .2 红耳龟组织匀浆T-AOC的变化

3 .3 红耳龟组织匀浆GSH-P X的变化

3 .4 红耳龟组织匀浆MDA的变化

3 .5 红耳龟组织病理切片

3 .6 红耳龟组织铜含量

3 .7 红耳龟组织铁含量

3 .8 红耳龟各组织锌含量比较

3 .9 红耳龟组织锰含量

4 讨论

4 .1 水体高铜对红耳龟抗氧化能力的影响

4 .2 水体高铜对红耳龟的组织病理影响

4 .3 水体高铜对红耳龟组织铜、铁、锌、锰含量的影响

5 总结

致谢

参考文献