用微型包囊技术研制新型高效畜用益生菌制剂

摘要

本项目拟采用微型包囊技术研制含畜肠道多种有益菌，活菌数高，活性强，耐胃酸，肠溶性好，常温保存期长的新型高效畜禽用益生菌制剂。本研究从仔猪的肠道和粪便中分离筛选出五种肠道菌，初步鉴定是肠道益生菌，在此基础上对各菌株的发酵特性进行探究。 以PTYG培养基对源材料进行初步分离。选用双歧杆菌增殖培养基，从13和30日龄健康仔猪粪便中分离纯化出双歧杆菌。从10日龄健康仔猪肠道内容物，选用酸化MR．S培养基，分离出乳酸杆菌；选用EC培养基，分离出粪肠球菌；选用麦芽汁培养基，分离出酵母菌；选用BLI培养基，分离出地衣芽孢杆菌。 对五种菌株分别进行镜检观察菌体形态，进行多种生理生化特性实验加以鉴定，并绘制生长曲线。还研究得出双歧杆菌最适初始pH值为7.2，最适培养温度为35℃；粪肠球菌最适初始pH值为9.2，最适培养温度为35℃。 采用正交实验方法确定双歧杆菌最佳培养基配方为酵母膏0.9％，胰蛋白胨0.6％，大豆蛋白胨0.3％，葡萄糖2.5％，双歧因子(低聚果糖)0.3％，生长因子(肝浸液)5％。 在后期研究工作中，确定混合发酵培养基组成及发酵条件和适合产业化规模的高效混合冻干保护剂和冻干优化条件，得到适合于产业化规模微型包囊技术的复合囊材和微型包囊条件。通过猪场实地试验，得到了畜用益生菌制剂产品最佳和剂型，并进行了毒性试验。 结果说明，猪源复合益生菌制剂可明显提高断奶仔猪生产性能和抗病力，是一种可以替代抗菌促长剂的安全无公害饲料添加剂。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章绪论

1.1长期以来动物防治战略和观念的错误

1.2动物益生菌制剂概述

1.2.1动物益生菌制剂的定义

1.2.2动物益生菌制剂的重要作用

1.2.3动物益生菌制剂所用菌株

1.3益生菌制剂在养猪生产中的应用

1.4影响益生菌制剂功效的因素

1.5动物益生菌制剂应用前景

1.6国内外在该领域的研究概况

1.7本课题的来源及主要内容

第二章材料与方法

2.1实验材料与仪器设备

2.1.1实验材料

2.1.2主要仪器与设备

2.2实验方法

2.2.1厌氧培养方法

2.2.2猪源双歧杆菌的分离、纯化

2.2.3猪源双歧杆菌的初步鉴定

2.2.4猪源双歧杆菌的特性研究

2.2.5猪源乳酸杆菌的分离纯化

2.2.6猪源乳酸杆菌的初步鉴定

2.2.7猪源乳酸杆菌的特性研究

2.2.8猪源粪肠球菌的分离纯化

2.2.9猪源粪肠球菌的初步鉴定

2.2.10猪源粪肠球菌的特性研究

2.2.11猪源酵母菌的分离纯化

2.2.12猪源酵母菌的初步鉴定

2.2.13猪源酵母菌的特性研究

2.2.14猪源地衣芽孢杆菌的分离纯化

2.2.15猪源地衣芽孢杆菌的初步鉴定

2.2.16不同种属益生菌培养与发酵工艺条件的优化研究

2.2.17适合于产业化规模的高效混合冻干保护剂的优化研究

2.2.18适合于产业化规模的复合囊材和微型包囊条件的确定

2.2.19畜用益生菌制剂产品最佳配方和剂型的优选研究

第三章结果与讨论

3.1猪源双歧杆菌的分离纯化

3.2猪源双歧杆菌的初步鉴定

3.2.1形态学鉴定

3.2.2生理生化特性鉴定

3.3猪源双歧杆菌的特性研究

3.3.1双歧杆菌生长曲线

3.3.2最适初始pH值

3.3.3最适培养温度

3.3.4培养基优化

3.4猪源乳酸杆菌的分离纯化

3.5猪源乳酸杆菌的初步鉴定

3.5.1形态学鉴定

3.5.2生理生化特性鉴定

3.6猪源乳酸杆菌的特性研究

3.7猪源粪肠球菌的分离纯化

3.8猪源粪肠球菌的初步鉴定

3.8.1形态学鉴定

3.8.2生理生化特性鉴定

3.9猪源粪肠球菌的特性研究

3.9.1生长曲线测定

3.9.2最适初始pH值

3.9.3最适培养温度

3.10猪源酵母菌的分离纯化

3.11猪源酵母菌的初步鉴定

3.11.1形态学鉴定

3.11.2生长特性与生理生化鉴定

3.12猪源酵母菌的特性研究

3.13猪源地衣芽孢杆菌的分离纯化

3.14猪源地衣芽孢杆菌的鉴定

3.14.1形态学鉴定

3.14.2生理生化特性鉴定

3.15不同种属益生菌培养与发酵工艺条件的优化研究

3.15.1肠道益生菌混合发酵方案的确定

3.15.2混合发酵培养基组成及发酵条件的确定

3.15.3混合发酵的研究结果

3.15.4 100L发酵罐中间生产试验的条件优化控制

3.16适合于产业化规模的高效混合冻干保护剂的优化研究

3.17适合于产业化规模的复合囊材和微型包囊条件的确定

3.17.1适合于产业化规模的复合囊材的确定

3.17.2微型包囊条件的确定

3.17.3微型包囊的崩解试验研究

3.17.4微囊的保存稳定性试验

3.18畜用益生菌制剂产品最佳配方和剂型的优选研究

3.18.1畜用益生菌饲料添加剂质量标准的制定

3.18.2畜用益生菌制剂产品最佳配方和剂型的选定

3.18.3益生菌制剂剂型的选定

3.19益生菌制剂产品质量及保存性的验证

3.19.1益生菌制剂产品质量

3.19.2益生菌制剂的保存性

3.20益生菌制剂在广州良种猪场的应用效果试验

3.21项目达到的技术指标，社会和经济效益

3.21.1项目达到的技术指标

3.21.2经济效益

3.21.3社会效益分析

3.22与国内外同类技术产品的比较

第四章结论与展望

参考文献

附录

攻读硕士学位期间取得的研究成果

致谢

评定意见