脾主运化水液与胃粘膜水通道蛋白3、4表达的相关性研究

摘要

祖国医学理论认为：脾(胃)为脏象学说的核心，主运化。按现代医学理论分析，脾(胃)是一个生理学和(或)病理学的概念，是以消化系统为主的多系统的功能综合单位。 近30多年来，关于脾本质的研究，证型上多集中在脾虚证，功能上多集中在脾主运化水谷的研究。对“脾主运化水液”的研究能揭示其生理机制和分子生物学基础，进一步补充“脾主运化”的研究。 一、文献研究 脾(胃)在水液代谢中的重要作用，可用“脾主运化水液”来概括。脾主运化水液，包括“化”和“运”两个方面。通过“脾的化”，能够把水谷物的液态成份转化成水液，能够把水液化生为唾、汗、尿、消化液及其它的生理性液体。通过“脾的运”，能够把津液和多余的水液转输至肺、肾和全身。“脾主运化水液”的功能健旺，是“脾主运化”的重要组成部分，可防止体内水液不正常的停滞，防止湿、痰、饮等病理产物的生成，对于维持体内津液平衡起着重要作用。 水通道蛋白(Aquaporins，AQPs)是生物膜上特异性转运水的整合蛋白。它们在机体的分布广泛，大多选择性地分布在那些与体液吸收、分泌有关的上皮细胞中，以及可协同跨细胞转运的内皮细胞中，执行着各部位的水分重吸收、液体分泌的功能，对维持细胞、组织、器官及全身的水平衡起着决定性作用。水通道蛋白与水代谢密切相关，与中医理论的肺、脾、肾等脏相关。如果不同组织细胞膜上的AQPs表达超过或低于正常水平，都会影响水的分泌或吸收，出现局部的或全身的水平衡紊乱。 因此，通过津液代谢和水平衡这一中心环节，“脾主运化水液”和AQPs必然存在着某种联系：水通道蛋白的正常表达可能是脾主运化水液的分子生物学基础；若水通道蛋白表达异常，脾主运化水液可能出现异常，成为脾虚湿困、寒湿困脾、脾胃湿热、胃阴不足等病证的发生机制之一。 近年来，人们从中医学的角度对水通道蛋白进行了很多有益的探讨，但需要进一步深入。 二、临床实验研究 本实验中，采用荧光定量PCR技术(FQ-PCR)，通过检测中医不同证型和脾胃湿热证不同程度慢性浅表性胃炎患者胃粘膜中AQP3、AQP4的基因表达，以正常组为对照；同时，选取脾主运化水液失常所导致的常见症状、体征作为一组变量，AQP3、AQP4做为另一组变量，进行典型相关分析。 研究对象的诊断标准、纳入标准、排除标准、病例来源均相同。所有病例均来源于广州中医药大学第一附属医院门诊和住院部；正常人作为对照，来自广州中医药大学志愿学生。所有受试对象均签订知情同意书。 实验一、慢性浅表性胃炎不同证型与AQP3、AQP4基因表达的关系 研究对象：脾胃湿热证组24例，脾虚湿困组10例，寒湿困脾组10例，胃阴不足组8例，正常人8例。 方法：胃镜下取胃体上部粘膜，液氮罐保存，荧光定量PCR法检测AQP3、AQP4在胃组织中的mRNA表达量。 结果：脾胃湿热证组AQP3、AQP4高于胃阴不足证组和正常人组(P＜0.05；0.01)，脾虚湿困证组、寒湿困脾证组AQP3均高于胃阴不足证组(P＜0.05；0.01)，脾虚湿困证组AQP4高于胃阴不足证(P＜0.05)，寒湿困脾证组AQP4均数高于胃阴不足证组但没有统计学意义(P＞0.05)；脾虚湿困证组、寒湿困脾证组AQP3、AQP4均数虽然高于正常人组，但没有统计学意义(P＞0.05)；脾胃湿热证组、脾虚湿困证组、寒湿困脾证组三组间AQP3、AQP4比较没有明显差异(P＞0.05)；胃阴不足证组和正常人组间AQP3、AQP4比较也没有明显差异(P＞0.05)。 实验二慢性浅表性胃炎脾胃湿热不同程度与AQP3、AQP4基因表达的关系 研究对象：脾胃湿热证轻度组8例，脾胃湿热证中度组8例，脾胃湿热证重度组8例，正常人8例。 方法：胃镜下取胃体上部粘膜，液氮罐保存，荧光定量PCR法检测AQP3、AQP4在胃组织中的mRNA表达量。 结果：脾胃湿热中度组、重度组AQP3、AQP4基因表达水平均高于正常对照组和脾胃湿热轻度组(P＜0.05；0.01)；正常对照组和脾胃湿热轻度组之间AQP3、AQP4无显著性差异(P＞0.05)；脾胃湿热重度组AQP4均数高于脾胃湿热中度组，但无显著性差异(P＞0.05)；脾胃湿热重度组AQP3高于脾胃湿热中度组(P＜0.05)。 实验三慢性浅表性胃炎症状、体征与AQP3、AQP4基因表达的关系 研究对象：慢性胃炎52例，正常人8例。 方法：利用SPSS11.5软件，建立数据文件。变量有：编号、年龄、性别、舌质(SZ)、舌苔厚薄(STHB)、舌苔范围(STFW)、肢体困重(ZTKZ)、神疲乏力(SPFL)、大便性状(DBXZ)、AQP3、AQP4。两组等级变量相关分析采用典型相关分析。 结果：舌苔范围、舌苔厚薄、肢体困重依次由大到小与AQP3相关，舌苔范围、肢体困重、舌苔厚薄依次由大到小与AQP4相关；舌苔范围对典型变量组1的典型变量1影响最大。 三、结论 1、慢性胃炎中医证型不同，胃粘膜AQP3、AQP4基因表达不同，胃粘膜AQP3、AQP4可能成为脾虚湿困、寒湿困脾、脾胃湿热、胃阴不足等病证的发生机制之一。 2、脾胃湿热组、脾虚湿困组、寒湿困脾组AQP3、AQP4基因表达水平均高于正常对照组和胃阴不足组，提示AQP3、AQP4与中医的“水湿、津液”有某种内在的联系，胃粘膜AQP3、AQP4的过高或过低表达是机体对水液代谢全身调节的局部表现。 3、脾胃湿热组、脾虚湿困组、寒湿困脾组三组间AQP3、AQP4基因表达没有差异，提示AQP3、AQP4主要与水湿有关，没有脾胃寒热虚实证候的特异性。 4、脾胃湿热程度不同，胃粘膜AQP3、AQP4基因表达不同。脾胃湿热中度组、重度组AQP3、AQP4基因表达水平均高于正常对照组和脾胃湿热轻度组，脾胃湿热程度与胃粘膜AQP3、AQP4基因表达相关，提示AQP3、AQP4与中医的“湿热”有某种内在的联系，而湿热的产生与脾主运化水液失常有关。 5、脾主运化水液失常所导致的症状、体征与胃粘膜AQP3、AQP4基因表达相关，提示脾主运化水液与胃粘膜AQP3、AQP4相关。

目录

文摘

英文文摘

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引言

第一部分文献研究

第二部分临床实验研究

第三部分讨论

第三部分结论与建议

参考文献

附表

附图

在校期间发表的论文、参与的课题和获奖情况

致谢