恶性骨肿瘤的证候调查及益气活血化痰法干预荷瘤小鼠的实验研究

摘要

恶性骨肿瘤总体发病率不高，但常造成病人肢体残疾甚至危及生命。近年来，手术、新辅助化疗等综合治疗方法的应用使恶性骨肿瘤的五年生存率大大提高，但中医药作为治疗恶性肿瘤综合治疗的一部分，其在稳定病灶、降低化放疗副作用、延长生存时间、改善生命质量等方面仍显示了独特的疗效和优势。由于各种原因条件的限制，中医药对恶性骨肿瘤的研究相对比较滞后，对其证候演变及病因病机还缺乏规律性的认识，中医药作用疗效及机理还有待实验研究的进一步验证和探讨。据此，本研究通过对删临床回顾性调查研究探讨恶性骨肿瘤的中医证候及其病因病机特点，并对益气活血祛痰法干预恶性骨肿瘤作用机理进行实验研究。 第一部分恶性骨肿瘤的证候调查 目的：探讨恶性骨肿瘤患者的中医证候及其病因病机的特点，为科研及临床工作提供基础性研究。 方法：采用回顾性调查研究方式，对删中医证型的分布、中医证型与年龄、性别、临床分期、血红蛋白浓度和尿本周氏蛋白含量等相关因素进行统计分析。 结果：1．MM各组证型之间有极显著性差异(P<0.01)，以虚证(包括气虚证、血虚证)、血瘀证、痰(湿)证(包括痰浊证、湿热证和寒湿证)为主；2．60岁以下和60岁以上的MM患者所表现的中医证型没有显著性差异(P>0.05)：3．男性和女性MM患者所表现的中医证型没有显著性差异(P>0.05)；4．MM患者所表现的中医证型在不同临床分期间有极显著性差异(P<0.01)；5．MM患者所表现的中医证型在不同血红蛋白浓度间有极显著性差异(P<0.01)：6．MM患者所表现的中医证型在不同尿本周氏蛋白含量间有极显著性差异(P<0.01)。 结论：在MM中医证型中，气虚证、血虚证、血瘀证、痰(湿)证是MM的主要证型，虚、瘀、痰在MM的发病及发展中是主要因素；年龄、性别因素与MM的中医证型无关；临床分期、血红蛋白浓度、尿本周氏蛋白含量等因素与MM的中医证型密切相关。 第二部分益气活血化痰法干预荷瘤小鼠的实验研究 目的：探讨加味四物汤对恶性骨肿瘤体内浸润生长的生物学行为的影响及其机制。 方法：建立KHOS成骨肉瘤原位移植模型，通过加味四物汤灌胃干预动物模型移植瘤的生物学行为，观察移植瘤的生长情况；通过RT-PCR方法定量检测移植瘤血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体KDR和Flt-1的表达。 结果：加味四物汤高剂量组有明显的抑瘤效果(P<0.01)，中、低剂量组无明显抑瘤作用(P>0.05)，加味四物汤高剂量组27．74％的抑瘤率高于中、低剂量组的3.98％、9.24％；加味四物汤高剂量组有明显抑制肿瘤组织VEGF、Flt-1、KDR表达的作用(P<0.05)；中、低剂量组抑制肿瘤组织VEGF、Flt-1、KDR表达的作用不明显(P>0.05)；中药高剂量组抑制肿瘤组织VEGF、Flt-1、KDR表达的作用优于中、低剂量组(P<0.05)。 结论：加味四物汤高剂量组可以抑制荷瘤小鼠体内肿瘤的生长，通过抑制VEGF、KDR、Flt-1的表达控制肿瘤新生血管的生长而达到阻止恶性骨肿瘤体内生长的目的。

目录

文摘

英文文摘

声明

引言

第一部分 文献研究

第一章 恶性骨肿瘤中医研究进展

1 历史沿革

2 病因病机研究

3 治则治法研究

4 中医药治

5 实验研究

6 存在问题和展望

第二章 血管内皮细胞生长因子在骨肿瘤血管新生中的作用

1 VEGF与血管新生

2 VEGF与肿瘤的发生和转移

3 VEGF与骨肿瘤

4 骨肿瘤的抗VEGF治疗

第二部分 恶性骨肿瘤的证候调查

1 材料与方法

1.1 病例选择标准

1.2 研究方法及研究内容

1.3 临床资料

1.4 诊断标准

1.5 统计学处理

2 结果

2.1 中医证型研究

2.2 中医证型与年龄的关系

2.3中医证型与性别的关系

2.4中医证型与临床分期的关系

2.5 中医证型与血红蛋白的关系

2.6 中医证型与尿本周氏蛋白的关系

3 讨论

3.1 研究目的与意义

3.2 研究结果分析

4 小结

第三部分 益气活血化痰法干预荷瘤小鼠的实验研究

1 实验材料

1.1 实验对象

1.2 主要实验仪器

1.3 主要试剂

2 实验方法

2.1 成骨肉瘤KHOS细胞的复苏、传代培养及冻存

2.2 移植瘤动物模型的建立

2.3 实验分组及给药

2.4 观察指标

2.5 统计学处理

3 实验结果

3.1 中药对肿瘤体积的影响

3.2 中药对肿瘤重理和抑瘤率的影响

3.3 RT-PCR检测

4 讨论

4.1 KHOS肿瘤细胞移植瘤模型的制备

4.2 对昆明小鼠接种KHOS骨肉瘤移植体积、瘤重及抑瘤率的影响

4.3 对VEGF及其受体影响

4.4 加味四物汤作用机理的探讨

结语

参考文献

附录

致谢