中药引经药醋柴胡对氧化苦参碱小鼠体内分布的影响

摘要

目的：
　　探讨醋柴胡对氧化苦参碱及其主要代谢产物苦参碱在小鼠体内分布的影响，验证中药引经药醋柴胡对苦参类生物碱的肝经引经作用。
　　方法：
　　1.组织内氧化苦参碱（Oxymatrine OMT）和苦参碱(Matrine MT)含量测定采用液相色谱-质谱联用技术，色谱柱为（Interlsil ODS-SP,5μm2.1×150mm）；流动相：甲醇-10mmol·L-1乙酸铵溶液（乙酸调PH值3.5）80:20；流速300μL·min-1；柱温为室温；进样量10μL。
　　组织按质量1:10加水匀浆，组织匀浆液和血浆样品采用含2%正丁醇的氯仿液进行液-液萃取。用电喷雾离子化和正离子多离子反应监测(MRM)方式检测氧化苦参碱（m/z265.3→247.2），苦参碱（m/z249.5→148.2）和内标物非那雄胺（m/z373.5→305.6）。
　　2.醋柴胡(Vinegar processing Radix Bupleuric VPRB)对氧化苦参碱和苦参碱体内分布的影响采用体内分布实验法。336只雄性KM小鼠随机分为8组，氧化苦参碱高剂量组（80mg·kg-1）和低剂量组(10 mg?kg-1）各4小组，即醋柴胡空白对照组、氧化苦参碱合并醋柴胡低、中、高剂量（400、800、1200 mg·kg-1）各1组。其中醋柴胡低剂量组选择0.167h、0.5h、1h、2h、4h、8h6个时间点，高剂量组选择0.167h、0.333h、0.667h、1h、1.5h、2h、4h、8h8个时间点，每个时间点6只动物。分别按对应剂量灌胃给药，于各时间点采集血浆、肝、心、脾、肺、肾组织，预处理后以HPLC-MS/MS法测定药物含量，分析其药动学过程，通过Tmax、Cmax、AUC、AUCOMT/AUCMT、AUCsum评价它对氧化苦参碱和苦参碱体内分布的影响。
　　3.参考现代靶性药物评价方法以相对摄取率（Re）和综合靶向效率（RTE）评价醋柴胡对氧化苦参碱和苦参碱小鼠体不同组织的靶向性。
　　结果：
　　1.氧化苦参碱和苦参碱线性范围均为4～2000ng·ml-1；定量下限均4ng·ml-1；各组织方法回收率均在87.1～110.3%；批内、批间精密度小于14%；提取回收率大于58.6%。
　　2.氧化苦参碱高剂量组OMT和MT在血浆及肝、心、脾、肺、肾组织内过程符合二房室模型，而氧化苦参碱低剂量组则大部分组织符合一房室模型。氧化苦参碱高剂量组，联合用VPRB后，肝脏氧化苦参碱VPRB-M及H组Cmax较对照组增加80%以上，肝脏VPRB-M组和H组等苦参碱Cmax都有增加，氧化苦参碱AUC为对照组的2.55倍和2.53倍，苦参碱增加19.09%和19.95%。氧化苦参碱低剂量组，肝脏VPRB-H组氧化苦参碱Cmax较对照组增加了31.45%，VPRB-L及H组苦参碱AUC较对照组有增加，其中VPRB-H组增加40.45%。同样给药条件下血浆、心、脾、肺、肾等组织Cmax和AUC等则主要呈现下降趋势，最大降幅可达95%。
　　3.肝脏VPRB-M和H组相对摄取率Re均大于1，其中氧化苦参碱高剂量组VPRB-M和H组氧化苦参碱Re高达2.55和2.53，OMT低剂量组VPRB-H组苦参碱Re值1.32其它组织小于等于1；肝脏VPRB组综合靶向效率增强，其中OMT高剂量组醋柴胡各组氧化苦参碱RTE分别为：0.40、2.16和2.11，苦参碱RTE值0.13、0.21和0.33；OMT低剂量组氧化苦参碱RTE分别为：0.04、0.10和0.33，苦参碱RTE分别为0.29、0.21和0.49，氧化苦参碱高低剂量组均以醋柴胡中高剂量作用最为显著。
　　结论：
　　HPLC-MS/MS含量测定方法准确、灵敏、简便、省时，适用于小鼠各脏组织中氧化苦参碱和苦参碱的含量测定。醋柴胡对氧化苦参碱体内分布的影响与氧化苦参碱剂量和醋柴胡剂量均有关系，其中醋柴胡中高剂量组可显著增加氧化苦参碱及其代谢产物苦参碱小鼠肝脏组织峰浓度和药物分布量，增强其相对摄取率和靶向效率，同时醋柴胡也可降低药物在其它组织的峰浓度、药物量及靶向效率，证实中药引经药可达到增效减毒的作用。

目录

声明

引言

第一章 文献研究

1 靶向给药系统的研究进展

1.1 生物物理靶向

1.2 生物化学靶向

1.3 生物免疫靶向和靶向前体药物

2 引经药综述

2.1 引经药的临床研究

2.2 引经药实验验证研究

2.3 引经药作用机制探索与研究

2.4 引经药的研究方法

3 柴胡研究

3.1 柴胡药理作用及相关机理

3.2 柴胡的炮制研究

4 氧化苦参碱抗癌作用研究进展

4.1 对肿瘤细胞的抑制或杀灭作用

4.2 下调肿瘤细胞免疫抑制作用

4.3 诱导细胞的凋亡

4.4 肿瘤化疗辅助作用

4.5 对肿瘤化学预防作用

5 本课题研究内容、目的和意义

第二章 实验研究

第一部分 氧化苦参碱和苦参碱HPLC-MS/MS含量测定方法的建立

1 实验材料

2 HPLC-MS/MS测定方法

3 讨论

第二部分 醋柴胡对氧化苦参碱小鼠药代动力学的影响

1 实验材料

2 实验方法

3 实验结果

4 小结

5 讨论

第三章 醋柴胡对氧化苦参碱和苦参碱小鼠体内分布影响的评价

1 分析软件及计算方法

2 评价参数与方法

2.1 相对摄取率Re：

2.2 相对综合靶向效率：

3.1相对摄取率（Re）

3.2 氧化苦参碱和苦参碱综合靶向效率(RTE)

3.3 小结与讨论

结语

参考文献

致谢