USMM联用技术在丹参活性成分提取分离中的集成应用

摘要

丹参始载于《神农本草经》，列为上品，以后历代本草均有收载。《中华人民共和国药典》（2010年版，一部）收载的丹参为唇形科植物丹参 Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根和根茎。丹参性苦、微寒，归心、肝经；具有活血祛瘀、痛经止痛、清心除烦、凉血消痈的功效。现代药理研究表明丹参的药理作用主要是对心血管系统，能扩张血管，加快血流，改善微循环，改变血液粘滞性，增加心肌供血量、供氧量、降低心肌耗氧量等，用于治疗心绞痛、心肌梗塞等心血管系统疾病。此外，丹参还具抗肿瘤、抗菌、抗炎等作用。
　　丹参提取的活性成分包括脂溶性成分和水溶性成分。根据多年来的文献报道，脂溶性活性成分为结晶性菲醌类化合物，主要包括丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮 B、二氢丹参酮参等；水溶性活性成分为邻苯二羟基化合物，主要包括丹酚酸B、丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸等。2010年版中国药典一部规定丹参药材分别以丹参酮ⅡA与丹酚酸B为含量测定指标。
　　此处为图片略过
　　USMM联用技术，是将超声波提取(Ultrasonic extraction)、超临界流体萃取（ Supercritical fluid extraction)、大孔树脂分离技术(Macroporous resins separation technology)、膜分离技术(Membrance separation technology)等提取、分离技术联合应用。本论文在文献研究的基础上，采用 USMM联用技术，对丹参药材脂溶性活性成分和水溶性活性成分提取、分离工艺进行研究。目的在于提高丹参活性成分的提取率和产品纯度，提高丹参提取物质量，为新型丹参制剂研究提供依据。主要内容包括以下几个方面：
　　1、超临界CO2萃取丹参脂溶性活性成分工艺研究
　　研究了萃取压力、萃取温度、萃取时间、夹带剂用量等因素对萃取率的影响，通过正交试验，以丹参酮ⅡA、隐丹参酮提取率为考察指标，得到优化的超临界CO2萃取工艺：丹参药材粉碎过20目筛，萃取压力25MPa，萃取温度40℃，萃取时间2小时，以与药材等量的95%乙醇作夹带剂。在该条件下，丹参酮ⅡA的提取率为87.6%，隐丹参酮提取率为88.7%，总丹参酮的提取率为88.5%，萃取物得率为2.1%。
　　2、超声强化超临界CO2萃取丹参脂溶性活性成分工艺研究
　　在超临界CO2萃取（以下简称SFE）丹参正交试验优选工艺基础上，筛选超声强化超临界CO2萃取（以下简称USFE）丹参工艺的各种因素水平，以丹参酮ⅡA、隐丹参酮的提取率为考察指标，确定丹参较佳USFE-CO2萃取工艺为：丹参药材粉碎过20目筛，萃取压力18MPa，萃取温度40℃，萃取时间1.5小时，以与药材等量的95%乙醇作夹带剂，超声波功率500W，超声频率40KHz。在该条件下，丹参酮ⅡA的提取率为88.1%，隐丹参酮提取率为89.8%，总丹参酮的提取率为88.8%，萃取物得率为2.7%。
　　3、超声波提取丹参USFE药渣水溶性活性成分工艺研究
　　根据文献报道，考察了加水量、提取次数、提取时间等因素对丹参 USFE药渣提取率的影响，以丹酚酸 B提取率为考察指标，得到优化的超声波提取工艺：加水20倍量，超声提取2次，每次提取20分钟，提取温度80℃。在该条件下，丹酚酸B的提取率为88.9%，总丹酚酸的提取率为89.7%，提取物干膏率为38.7%。
　　4、大孔树脂技术纯化丹参水溶性活性成分工艺研究
　　研究了 D101大孔吸附树脂用量、洗脱解吸乙醇浓度、乙醇用量等主要影响因素对丹参水溶性活性成分纯化工艺的影响，以丹酚酸B转移率为考察指标，得到大孔树脂纯化丹参水溶性活性成分的优选工艺：D101大孔吸附树脂用量为生药量5倍，洗脱解吸乙醇浓度为70%，乙醇用量为12倍柱体积。在该条件下，丹酚酸 B的转移率为84.6%，总丹酚酸的提取率为83.8%，提取物干膏率为14.2%，比上D101大孔吸附树脂前降低了24.5%。
　　5、膜分离技术纯化丹参水溶性活性成分工艺研究
　　研究了膜规格、药液浓度、操作压力等因素对对丹参水溶性活性成分膜分离纯化工艺的影响，以丹酚酸B转移率为考察指标，得到膜分离技术纯化丹参水溶性活性成分的优选工艺：用10000 Da规格的超滤膜，药液浓度0.1g/ml，操作压力0.2-0.3MPa。在该条件下，丹酚酸B的转移率为86.2%，总丹酚酸的提取率为85.4%，提取物干膏率为33.9%，比上D101大孔吸附树脂前降低了4.8%。
　　6、大孔树脂-膜分离技术联用纯化丹参水溶性活性成分工艺研究
　　丹参 USFE渣超声水提液先经膜分离、再上大孔树脂，二者联用工艺纯化后，丹酚酸B的转移率为83.91%，总丹酚酸的转移率为83.14%，干膏率为13.60%；丹参USFE渣超声水提液先上大孔树脂、再膜分离，二者联用工艺纯化后，丹酚酸B的转移率为84.10%，总丹酚酸的转移率为83.59%，干膏率为13.82%。

目录

声明

引言

第一部分 文献研究

一、丹参的研究概况

二、超临界CO2萃取在丹参提取中应用研究

三、超声波提取在丹参提取中应用研究

四、大孔吸附树脂在丹参提取分离中应用研究

五、膜分离技术在丹参提取分离中应用研究

六、USMM联用技术在丹参提取分离中应用研究

第二部分 丹参药材活性成分含量测定

一、丹参药材脂溶性活性成分含量测定【27】

二、丹参药材水溶性活性成分含量测定【27】

第三部分 USMM联用技术在丹参活性成分提取分离中应用研究

一、超临界CO2萃取丹参脂溶性活性成分工艺研究

二、超声强化超临界CO2萃取丹参脂溶性活性成分工艺研究

三、超声提取丹参水溶性活性成分工艺研究

四、丹参水溶性活性成分大孔吸附树脂-膜分离纯化工艺研究

五、USMM联用技术在丹参活性成分提取分离中应用

结语

1、试验总结

2、创新性

3、展望

参考文献

致谢