IL-10基因多态性与CKD1期湿热体质相关性研究

摘要

目的:
　　通过对白细胞介素-10基因-592位点单核苷酸多态性与慢性肾脏病1期患者湿热体质的相关性研究，探讨白细胞介素-10基因-592位点单核苷酸多态性作为慢性肾脏病1期患者湿热体质分型的客观指标的合理性。
　　方法:
　　自2014年3月至今，从广东省中医院肾内科住院部和门诊部挑选出符合条件的慢性肾脏病1期（CKD1期）患者，经患者知情同意后，应用中医《体质量表》及《中医体质分类与判定》对其进行体质判定并统一划分为CKD1期湿热质组（共29例）及CKD1期平和质组（共31例）。用EDPA管抽取2ml全血进行离心，弃去上清液，保留沉淀做为实验所需的血标本，在-20℃冰箱下储存。统一把所有血标本一次性进行DNA提取纯化以获得DNA模板溶液，并用紫外分光光度计对其进行浓度及纯度检测，保留符合实验要求的DNA模板溶液。将DNA模板溶液进行白细胞介素-10(IL-10)启动子目的序列的聚合酶链式反应(PCR)扩增，并把PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳及以紫外灯检测，保留成功扩增出IL-10基因目的DNA片段的PCR产物。将PCR产物送至生物工程公司（生工）广州测序部进行DNA测序。对生工返回的测序结果用基因计数法直接计算IL-10基因-582位点等位基因、基因型在湿热质组和平和质组的频数，并应用SPSS19.0软件采用卡方检验方法对比IL-1基因-592位点等位基因频率、AA基因型（或CA+CC基因型）频率、CC基因型（或AA+CA基因型）频率在CKD1期湿热质组与CKD1期平和质组间的差异。
　　结果:
　　慢性肾脏病1期患者，IL-1基因-592位点等位基因频率、AA基因型（或CA+CC基因型）频率、CC基因型（或AA+CA基因型）频率，在湿热质组与平和质组间比较均不存在显著的统计学意义。
　　结论:
　　本实验显示IL-10基因-592C/A多态性与慢性肾脏病1期患者湿热体质之间无显著相关性，IL-10基因-592C/A多态性不能作为慢性肾脏病1期患者湿热体质分型的客观指标。

目录

声明

摘要

引言

第一章 文献研究

1．1 体质与基因

1．1．1 古代文献对体质的阐述

1．1．2 现代对体质的认识

1．1．3 基因检测与体质分型

1．2 IL-10基因与慢性肾脏病

1．2．1 IL-10与慢性肾脏病

1．2．2 IL-10基因多态性与慢性肾脏病相关性研究

1．3 慢性肾脏病与湿热体质

1．4 IL-10基因多态性与湿热体质

第二章 实验研究

2．1 病例选择

2．1．1 研究对象

2．1．2 诊断标准

2．1．3 纳入标准

2．1．4 排除标准

2．1．5 剔除病例标准

2．2 实验过程

2．2．1 标本采集和保存

2．2．2 DNA提纯

第三章 结果与讨论

3．1 数据汇总处理

3．1．1 计算基因型及等位基因频率

3．1．2 Hardy-Weinberg检验

3．1．3 湿热质组与平和质组IL-10-592位点基因频率及基因型分布

3．2 结果

3．3 结论

3．4 讨论

结语

参考文献

附录

在校期间发表论文情况

致谢