广藿香酮、亚硫酸氢钠穿心莲内酯抗小鼠皮肤光老化作用

摘要

目的:
　　皮肤光老化(Photoaging)是指由于皮肤长期暴露于紫外线的辐射之下，使得皮肤过早地出现老化现象的一类疾病。有研究表明，暴露皮肤的老化约90％是由紫外线诱导的皮肤光老化作用引起。皮肤光老化不仅会引起皮肤的粗糙、皱纹和松弛等宏观病变，甚至可引起皮肤癌的发生，严重危害人类的健康。紫外线辐射作用于皮肤组织，诱导大量ROS的累积，导致炎症介质的过度表达，从而促使MMPs的异常分泌，最终导致皮肤组织中细胞外基质的结构性与功能性改变。基于皮肤光老化的发病机制，具有抗氧化或抗炎作用的化合物可能具有潜在的抗皮肤光老化活性。
　　广藿香酮(PO)是传统岭南道地药材广藿香及其挥发油的主要活性化学成分之一，已被证实具有良好的抗炎抗氧化功效。亚硫酸氢钠穿心莲内酯(ASB)是传统广药穿心莲的主要成分穿心莲内酯的水溶性衍生物，亦已被证实具有良好的抗炎抗氧化功效。但迄今为止尚未发现有关PO或ASB抗皮肤老化作用方面的相关报道。因此，本研究拟在体内动物模型上，开展PO与ASB对皮肤光老化的防治作用研究，并探讨其作用机制。
　　方法:
　　本研究以UVA+UVB为光源辐射雌性小鼠的背部皮肤，建立光老化模型。每天于背部皮肤涂布PO或ASB进行治疗，每周进行药效评价以验证PO与ASB对紫外线辐射诱导皮肤光老化的保护作用，主要包括皮肤宏观评价，皮肤弹性测试以及皮肤厚度测量。实验结束后通过H&E染色、弹性纤维染色和胶原纤维染色等实验方法，观察皮肤组织结构的变化，表皮层的厚度变化，胶原纤维和弹性纤维的形态变化及分布状况，整体评价PO与ASB对皮肤光老化小鼠皮肤组织结构的保护作用。同时，为了进一步探讨PO与ASB的抗皮肤光老化机制，本研究通过生化定量法测定皮肤组织中抗氧化酶（CAT、GSH-Px和SOD）的活性，脂质过氧化物MDA以及胶原的含量;通过ELISA法测定炎症因子（TNF-α、IL-6、IL-10、IL-1β和COX-2、PGE2）的表达，以及MMP-1和MMP-3的水平。
　　结果:
　　1.PO抗皮肤光老化作用研究
　　药效评价实验结果显示，PO可显著改善光老化小鼠的皮肤宏观表现、皮肤弹性以及皮肤厚度;组织病理学观察显示，PO可显著降低紫外线辐射诱导的表皮层异常增厚，抑制胶原纤维和弹性纤维的降解。同时，皮肤涂布给予PO可显著升高抗氧化酶的活力，包括CAT、SOD与GSH-Px，降低MDA的含量;PO可有效降低炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β、COX-2和PGE2的过度表达;此外，PO治疗还能显著降低MMP-1与MMP-3的异常分泌。
　　2.ASB抗皮肤光老化作用研究
　　药效评价实验结果显示，ASB可显著改善光老化小鼠的皮肤宏观表现、皮肤弹性以及皮肤厚度;组织病理学观察显示，ASB可显著降低紫外线辐射诱导的表皮层异常增厚，抑制胶原纤维和弹性纤维的降解。同时，皮肤涂布给予ASB可显著升高抗氧化酶的活力（CAT与SOD），降低MDA的含量;ASB可有效降低炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的过度表达;此外，PO治疗还能显著降低MMP-1与MMP-3的异常分泌。
　　结论:
　　本研究首次探讨了PO与ASB的抗小鼠皮肤光老化作用。PO与ASB均可显著改善紫外线辐射诱导的皮肤宏观损伤和组织病理学病变。其相关作用机制探讨发现，PO与ASB均能显著提高皮肤组织中抗氧化酶的活力，降低脂质过氧化物MDA的含量，从而对抗紫外线辐射诱导的体内氧化应激压力的显著上升;同时，PO与ASB还能有效降低炎症因子的过度表达，减轻炎症反应损伤。PO与ASB通过抗炎途径和抗氧化途径共同抑制MMPs的异常分泌，抑制细胞外基质的降解，维持弹性纤维、胶原纤维结构的完整性，从而保护皮肤免受紫外线辐射的损害。

目录

声明

摘要

引言

第一章 文献研究

第一节 皮肤光老化的研究进展

一、皮肤光老化临床特征与组织学变化

二、紫外线的分类及其作用

三、紫外线诱导皮肤光老化的发生机制

四、皮肤光老化模型的制备

五、皮肤光老化的评价方法

第二节 广藿香酮的研究进展

一、广藿香的研究概述

二、广藿香酮的理化性质

三、广藿香酮的药效作用研究

第三节 亚硫酸氢钠穿心莲内酯的研究进展

一、穿心莲的研究概述

二、穿心莲内酯的研究概述

三、亚硫酸氢钠穿心莲内酯的研究概述

第二章 实验研究

第一节 PO抗小鼠皮肤光老化作用研究及其机制探讨

一、实验材料

二、实验方法

三、实验结果

四、讨论

第二节 ASB抗小鼠皮肤光老化作用研究及其机制探讨

一、实验材料

二、实验方法

三、实验结果

四、讨论

结语

一、研究思路与讨论

二、展望

参考文献

附录

在校期间发表论文、参与课题及获奖情况

致谢

附件