海南粗榧内生真菌中的抗肿瘤次生代谢产物的研究

摘要

本文对海南粗榧内生真菌及其次生代谢产物进行了研究。 从海南粗榧植物健康的树皮、枝、叶中分离得到72株内生真菌。依据其菌落形态和显微特征，将其中68株归为半知菌类，即产孢的33株鉴定为5个属，未产孢的35株中除1株鉴定为丝核霉属外，其余34株暂归为无孢菌群。还有4株属于担子菌纲。结果表明，海南粗榧内生真菌对宿主具有一定的组织专一性，树皮的真菌在数量、种群及其组成方面与枝、叶的相比存在较大差异。 选取其中的S26,S49菌株分别进行了次生代谢产物研究。用多种柱色谱技术反复进行分离纯化，从海南粗榧的内生真菌S26发酵液中共分离得到9个化合物。根据波谱数据和理化性质对其结构进行鉴定，分别是：(-)-5-methylmellein(1)、(-)-3,5-dimethyl-8-methoxy-3,4-dihydroiso-coumarin(2)、ergosterolperoxide(3)、(3β，5α,8α,22E,24R)-5,8-epidioxy-ergosta-9(11)，22-trien-3-ol(4)、22E,24R-ergosta-7,22-diene-3β,5α,6β，9α-tetraol(5)、对羟基苯乙醇(6)，(3R，12aS)-3-methyl-2,3,6,7，12，12a-hexa-hydro-pyrazino[1，2-b]b-carboline-1，4-dione(7)、棕榈酸(8)、单油酸甘油脂(9)。其中化合物8在体外对胃癌细胞SGC-7901表现出抑制活性。从S49发酵液中共分离得到6个化合物，分别是：CHE-13(10)，细胞松弛素D(11)，谷甾醇(12)，(3β，5α，6β，22E)-麦角甾-7，22-二烯-3，5，6-三醇(13)，CHF-22(14)，CHE-21(15)，hymatoxinA(16)，ergosterolperoxide(17)，。其中化合物11在体外对胃癌细胞SGC-7901表现出较强的抑制活性，且该化合物为发酵产物中的主要成分(20mg/L)，具有一定的开发应用前景。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略语

声明

第一章文献综述

1海南粗榧植物及其现代研究

1.1海南粗榧植物简介

1.2化学成分

1.3药理活性研究

1.4质量标准研究

2国内外对植物内生真菌的研究概况及进展

2.1内生真菌的定义

2.2植物内生真菌的普遍存在性

2.3植物内生真菌的生物学作用

2.4植物内生真菌抗肿瘤代谢产物的研究

2.5我国内生真菌研究概况

3植物内生真菌的分离

3.1寄主植物的选择

3.1植物样品的采集及预处理

3.2表面消毒效果的检验

4本课题研究的目的和意义

第二章海南粗榧内生真菌的分离与初步鉴定

1材料和方法

1.1材料

1.2方法

2结果

3讨论

第三章海南粗榧内生真菌S26化学成分研究

1仪器与材料

1.1仪器

1.2溶剂

1.3常用显色剂

1.4材料

1.5培养基

2方法

2.1甲酯化反应

2.2细胞株及培养条件

2.3环肽的水解方法

2.4 GC-MS检测条件

2.5生物活性测试方法

3提取与分离

4化合物的结构

5化合物物理常数与波谱数据

5化合物的活性

第四章海南粗榧内生真菌S49化学成分研究

1仪器与材料

1.1仪器

1.2材料

1.3培养基

2方法

3提取与分离

5化合物物理常数与波谱数据

6化合物活性测试

小结

参考文献

附图1海南粗榧内生真菌菌落及显微形态照片

附图2化合物相关谱图

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致谢