可溶性CD40配体对Hl-60细胞增殖及survivin mRNA表达的影响

摘要

目的：研究可溶性CD40配体(sCD40L)对人白血病HL-60细胞增殖的作用，并探讨其对survivin mRNA及IL-8表达的影响。
　　 方法：1)采用MTT法检测sCD40L孵育HL-60细胞体外增殖的影响；2)通过RT-PCR检测sCD40L对HL-60细胞survivin mRNA表达的影响；3)采用ELISA测定sCD40L对HL-60细胞分泌IL-8的影响。
　　 结果：
　　 1)sCD40L三组不同浓度(2.00μg/mL、4.00μg/mL和6.00μg/mL)均能显著抑制HL-60细胞增殖，并呈剂量依赖关系。如sCD40L上述三组浓度作用24h后，其抑制率分别为(31.6±3.8)％、(43.9±4.0)％和(60.6±3.1)％，均好于2.5umol/L的As2O3阳性对照组(21.9±2.1)，且有显著统计学意义(P<0.05)。在24-72h范围内，以作用48h时抑制效果最好，上述三组不同浓度sCD40L作用48h后抑制率分别为(71.5±2.3)％、(77.5±2.4)％、(89.2±1.3)％，均高于同浓度作用24h和72h，与As2O3对照组相比，有显著统计学意义(P<0.05)。
　　 2)sCD40L三组不同浓度(2.00μg/mL、4.00μg/mL和6.00μg/mL)均能显著抑制HL-60细胞中survivin mRNA表达，如sCD40L作用24h后，survivin mRNA表达量分别为255.449±24.102、203.369±17.885和137.952±11.921，其中4.00μg/mL和6.00μg/mL的sCD40L均低于2.5umol/L的As2O3阳性对照组(317.712±21.935)，有显著统计学意义(P<0.05)。在24-72h范围内，以作用48h时HL-60细胞中survivin mRNA表达量最低，均低于同浓度作用24h和72h。
　　 3)sCD40L三组不同浓度(2.00μg/mL、4.00μg/mL和6.00μg/mL)均能显著抑制HL-60细胞分泌IL-8，如sCD40L上述三组浓度作用24h后，IL-8表达量分别为738.958±7.187、713.750±10.000和515.000±9.584，呈浓度依赖性，以6.00μg/mL的sCD40L作用时最低，且低于2.5umol/L的As2O3阳性对照组(722.038±7.500)，有显著统计学意义(P<0.05)。在24-72h范围内，以作用48h时HL-60细胞分泌IL-8最低，均低于同浓度作用24h和72h，且与As2O3对照组相比，有显著统计学意义(P<0.05)。
　　 结论：
　　 1)sCD40L在体外能够明显抑制HL-60细胞增殖，具有浓度依赖性，且与作用时间有关。
　　 2)sCD40L，抑制HL-60细胞增殖与survivin及IL-8表达相关，并可能与其下调有关。