Ras/Raf/MAPK信号传导通路与病理性瘢痕和瘢痕癌相关性研究

摘要

目的：探讨Ras/Raf/MAPK信号通路和通路下游靶基因CyclinD1与病理性瘢痕及瘢痕癌的相关性，分析病理性瘢痕癌变的相关因素，探讨瘢痕癌靶向治疗靶点的可行性。
　　 方法：(1)运用激光扫描共聚焦显微技术，对15例病理性瘢痕和25例瘢痕癌石蜡组织切片中K-ras、H-ras、N-ras和CyclinD1进行免疫荧光双标记，并采集三维立体图象。(2)采用免疫组织化学(SP)法分别检测10例正常皮肤组织，15例病理性瘢痕和20例瘢痕癌三组组织中MAPK、CyclinD1蛋白的表达。(3)采用核酸分子原位杂交技术检测三组组织中MAPKmRNA、CyclinD1mRNA的表达。(4)结合图像分析，分别计算被检组织中所检各项指标的平均光密度和阳性面积，所有数据运用SPSS16.0软件包进行统计学分析。
　　 结果：(1)激光扫描共聚焦显微结果：K-ras、H-ras、N-rag和CyclinD1在病理性瘢痕上皮中呈现较弱荧光，为弱阳性表达；在瘢痕癌组织中呈现较强荧光，为强阳性表达。其表达部位和表达强度与免疫组织化学标记结果相一致。(2)MAPK蛋白、MAPKmRNA在正常皮肤表皮呈阴性表达，在皮肤病理性瘢痕上皮中呈弱阳性表达，在瘢痕癌组织中呈强阳性表达。瘢痕癌组表达水平(阳性面积)、表达强度(平均光密度)与正常皮肤、病理性瘢痕组比较，差异均有统计学意义(P<0.01)；但正常皮肤组与病理性瘢痕组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。(3)CyclinD1蛋白、CyclinD1mRNA在正常皮肤表皮呈阴性表达，在病理性瘢痕上皮中呈弱阳性表达，在瘢痕癌组织中呈强阳性表达。瘢痕癌组的表达(即阳性面积和平均光密度)与正常皮肤组及病理性瘢痕组相比较，差异均有统计学意义(P<0.01)；但正常皮肤组与病理性瘢痕组相比较，差异无统计学意义(P>0.05)。(4)相关性分析：在瘢痕癌组织中，MAPK与MAPKmRNA的表达、CyclinD1与CyclinD1mRNA的表达、CyclinD1与MAPK蛋白的表达、CyclinD1mRNA与MAPKmRNA的表达均呈正相关。
　　 结论：(1)通路中的Ras、MAPK、CyclinD1蛋白及其MAPKmRNA、CyclinD1mRNA在病理性瘢痕上皮中的低表达，提示与病理性瘢痕上皮癌变的相关性意义有限。(2)通路中的Ras、MAPK、CyclinD1蛋白及其MAPKmRNA、CyclinD1mRNA在瘢痕癌中的高表达，可能与瘢痕癌的发生有相关性，各种基因共同发挥了协同作用。(3)通路中的Ras、MAPK、CyclinD1蛋白及其MAPK mRNA、Cyclin D1mRNA在瘢痕癌中呈现高表达，可作为靶向治疗的靶点，提示对瘢痕癌实行靶向治疗的理论依据和可行性存在。