槐耳浸膏诱导人胃腺癌细胞株MKN28、MKN45凋亡机制研究

摘要

目的:本实验通过不同浓度槐耳浸膏与不同分化水平胃癌细胞相互作用，检测Bcl-2、Caspase-3、Fas mRNA及蛋白在胃癌细胞中的表达水平，从而探讨槐耳浸膏诱导人胃癌细胞凋亡分子调控机制。为槐耳浸膏在临床治疗胃癌提供切实的理论依据。
　　 方法:浓度为0mg/ml、5mg/ml、10mg/ml的槐耳浸膏作用于胃癌细胞系MKN-28及MKN4524h后，采用RT-PCR及western blot法检测Bcl-2、Caspase-3、 Fas mRNA和蛋白的表达水平。凝胶成像系统采集处理分析结果。SPSS17.0处理分析统计数据。
　　 结果:0mg/ml、5mg/ml、10mg/ml槐耳浸膏组与MKN28细胞作用后，RT-PCR法检测Bcl-2 mRNA灰度分析结果分别为:1.22±0.04、0.65±0.06、0.51±0.05，Caspase-3mRNA灰度分析结果分别为0.64±0.03、0.73±0.02、1.27±0.04，Fas mRNA灰度分析结果分别为:0.60±0.05、0.74±0.04、1.01±0.04。0mg/ml、5mg/ml、10mg/ml槐耳浸膏组与MKN45细胞作用后，RT-PCR法检测Bcl-2 mRNA灰度分析结果分别为:1.20±0.06、0.83±0.05、0.64±0.05，Caspase-3 mRNA灰度分析结果分别为0.65±0.01、0.70±0.03、0.99±0.08，Fas mRNA灰度分析结果分别为:0.67±0.06、0.83±0.06、0.90±0.04。 P＜0.05有统计学意义。
　　 0mg/ml、5mg/ml、10mg/ml槐耳浸膏组与MKN28细胞作用后，western blot法检测Bcl-2蛋白灰度分析结果分别为:0.87±0.01、0.67±0.04、0.41±0.05，Caspase-3蛋白灰度分析结果分别为0.64±0.04、0.80±0.05、0.96±0.04，Fas蛋白灰度分析结果分别为:0.86±0.02、1.07±0.02、1.13±0.04。0mg/ml、5mg/ml、10mg/ml浓度槐耳浸膏组与MKN45细胞作用后，western blot法检测Bcl-2蛋白灰度分析结果分别为:0.93±0.03、0.83±0.05、0.57±0.02，Caspase-3蛋白灰度分析结果分别为0.76±0.02、0.86±0.05、1.01±0.07，Fas蛋白灰度分析结果分别为:0.67±0.05、0.83±0.05、0.90±0.03。P＜0.05有统计学意义。
　　 结论:不同浓度槐耳浸膏抑制细胞Bcl-2 mRNA及蛋白表达，上调Caspase-3及FasmRNA及蛋白的表达，具有剂量依赖性。在同一槐耳浓度下，高分化腺癌MKN28细胞与低分化腺癌MKN45细胞Bcl-2、Caspase-3及Fas mRNA及蛋白表达水平有差异，MKN28细胞对槐耳浸膏诱导凋亡更敏感。槐耳浸膏可通过Bcl-2、Caspase-3介导的线粒体凋亡信号通路及Caspase-3、Fas介导死亡受体信号通路诱导胃癌细胞凋亡。具有一定的抗肿瘤作用，为槐耳浸膏以后用于临床辅助治疗胃癌提供了理论依据。

目录

声明

英文缩略词表

摘要

前言

1 材料与方法

1．1 主要实验材料

1．2 主要实验试剂及配置方法

1．3 实验方法

1．4 统计分析方法

2 结果

2．1 RT-PCR法检测MKN28、MKN45细胞Bcl-2，Caspase-3，Fas mRNA表达水平

2．2 Western blot法检测MKN28、MKN45细胞Bcl-2，Caspase-3，Fas蛋白表达水平

3 讨论

4 结论

参考文献

综述

致谢

作者简介