胆石六号汤剂抗胆结石形成作用及机制研究

摘要

目的:观察胆石六号汤剂对C57小鼠胆固醇结石和豚鼠胆色素结石形成的防治作用,并初探其作用机制。
　　方法:
　　(1)对 C57小鼠胆固醇结石的影响将50只雌性小鼠随机分为空白对照组(n=10)、模型组(n=15)、胆石六号汤剂组(n=15)和牛磺熊去氧胆酸阳性组(n=10)。除空白对照组外,其余各组采用高脂饮食诱发法建立胆固醇结石模型。造模60天,第61天开始胆石六号汤剂组给予胆石六号汤剂21 g·kg-1·d-1,阳性组给予牛磺熊去氧胆酸12 mg·kg-1·d-1灌胃(ig)治疗。ig给药30天后观察各组小鼠的成石率、血脂含量、肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。
　　(2)对豚鼠胆色素结石的作用及机制研究40只雌性豚鼠随机分为空白对照组(n=10)、模型组(n=15)和胆石六号汤剂组(n=15)。除空白对照组外,其余2组采用饮食诱发法建立胆色素结石模型。同时胆石六号汤剂组给予胆石六号汤剂7.7 g·kg-1·d-1 ig30天。之后观察各组的成石率、血清胆色素含量、肝脏SOD活性及MDA含量、胆囊收缩素a受体(CCKaR)、5-羟色胺3a受体(5-HT3aR)基因和蛋白的表达情况。
　　结果:
　　(1)对C57小鼠胆固醇结石模型的影响胆石六号汤剂给药剂量为21 g·kg-1·d-1,模型组成石率为85.71％,显著高于空白对照组、胆石六号汤剂组和阳性组(P<0.05)。胆石六号汤剂组血清低密度脂蛋白、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、间接胆红素、总胆汁酸含量低于模型组(P<0.05),小鼠肝脏SOD活性升高和MDA含量下降,与模型组比较(P<0.05)。
　　(2)对豚鼠胆色素结石模型的作用及机制研究空白对照组仅有1只有结石发生,成石率为10.00%;模型组成石率为91.67%。胆石六号汤剂组成石率为26.67%,较模型组明显降低。胆石六号汤剂组血清总胆红素、直接胆红素和间接胆红素含量低于模型组(P<0.05),同时肝脏SOD活性明显高于模型组,而MDA含量明显低于模型组。RT-PCR检测模型组中CCKaR、5-HT3aR基因的表达明显低于空白组和胆石六号汤剂组(P<0.05)。免疫组化结果显示模型组5-HT3aR蛋白相对于空白组显著下降,而胆石六号汤剂组阳性表达相对于模型组显著上升(P<0.05)。模型组CCKaR蛋白的表达相对于空白组有所下降,胆石六号汤剂组阳性表达相对于模型组有上升趋势,但是差异没有统计学意义(P>0.05)。
　　结论:
　　(1)胆石六号汤剂可降低小鼠胆固醇结石模型成石率,改善血清和肝脏的生化相关指标,从而发挥防治胆结石形成的作用。
　　(2)胆石六号汤剂可降低豚鼠胆色素结石模型成石率,其机制与其抗氧化应激有关。
　　(3)胆石六号汤剂显著影响了胆色素结石豚鼠胆组织CCKaR、5-HT3aR基因及蛋白的表达,其防治胆色素结石的作用一定程度上是通过增加它们的表达实现的。

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前言

1 材料

1.1 主要实验仪器

1.2 主要实验试剂

1.3 药材

1.4 实验动物

1.5 动物饲料

实验一 胆石六号汤剂对C57小鼠胆固醇结石的影响

2.1 引言

2.2材料与方法

2.3 结果

2.4 讨论

实验二 胆石六号汤剂对豚鼠胆色素结石的作用及机制研究

3.1 引言

3.2 材料

3.3 方法

3.4 结果

3.4 讨论

4 结论

参考文献

综述

致谢

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