精神分裂症患者血清32kDa蛋白标志物的研究

摘要

目的:以32kDa蛋白这个新的精神分裂症生物标记物为指标,通过优化蛋白沉淀方法,蛋白电泳,进行蛋白分离及质谱分析。探索32kDa蛋白作为一种新的精神分裂症简便诊断指标的临床价值。
　　方法:将采集的118份血清样本(精神分裂症60例,健康体检者58例)分为两个组,分别选用 PEG蛋白沉淀法和三氯乙酸/丙酮沉淀法获得样本沉淀物。利用SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳评估沉淀方法,同时获得蛋白目的条带;提取目的蛋白条带进行质谱检测分析。
　　结果:使用三氯乙酸/丙酮沉淀法处理的蛋白经SDS-PAGE电泳和凝胶图谱对比,没有发现目的蛋白条带,PEG蛋白沉淀法则发现目的蛋白条带32kDa蛋白,而且实验稳定性较好,所以本实验使用7％PEG蛋白沉淀。
　　精神分裂症组与正常对照组凝胶图谱蛋白条带比较,精神分裂症组32kDa蛋白检出率为63.3%(38/60),正常对照组均未发现(0/58)。两组之间的差别具有明显统计学意义P<0.001。
　　通过对36例阳性患者32kDa蛋白条带进行质谱检测分析,在分子量30KD-35KD范围内鉴定出了13种蛋白,其中7种蛋白出现频率较高,另外6种出现频率较低,其中以cDNA高度相关蛋白出现频率最高。
　　结论:精神分裂症患者血清中存在未知的特异性蛋白,分子量约为32kDa,与正常人比较存在明显的蛋白表达差异。

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前言

1 材料与方法

1.1 主要实验材料

1.2 主要仪器

1.3 主要实验试剂

1.4. 主要溶液的配制

2 实验方法

2.1 血清蛋白的前期处理

2.2 SDS-PAGE凝胶电泳

2.3染色

2.4脱色

2.5血清蛋白凝胶成像图的采集和分析

2.6质谱分析

3 结果

3.1血清蛋白沉淀方法的优化

3.2 32kDa蛋白阳性率的比较

3.3 32kDa蛋白质谱分析

4 讨论

5 结论

6 展望

参考文献

综述

致谢

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