失肌皮神经与屈肘重建后供受体肌肌肉型AChR亚型表达变化

摘要

目的:探索失肌皮神经损伤和屈肘重建术后,肱二头肌(受体肌)和胸大肌斜部(供体肌)内肌肉型 AChR亚型(ε-AChR和γ-AChR)的表达变化规律,为防治供受体肌的萎缩提供科学指导。
　　方法:1.实验动物及分组:42只成年SD大鼠,体重200±50g,不拘雌雄,分A、B、C、D4组,其中B、C、D组又分别分为1、2组;它们分别是A组(正常组), B1、B2组(肌皮神经切断2、4 w组),C1、C2组(假移植术2、4 w组),D1、D2组(重建屈肘功能术2、4 w组),每组6只。
　　2.大体解剖。
　　3.建立失肌皮神经损伤后胸大肌斜部移位重建屈肘功能动物模型。
　　4.肌形态学观察和称量肌湿重。
　　5. RT-PCR检测ε-AChR和γ-AChR mRNA表达。
　　6. Western blot检测ε-AChR和γ-AChR蛋白表达。
　　结果:1.大体观察:胸大肌斜部移位缝合至肱二头肌腱止端时,不会伤及血管神经,能满足无张力缝合。失肌皮神经后肱二头肌进行性萎缩、色泽变淡、觅食受限;重建屈肘术后,上述变化逐渐改善,胸大肌斜部手术前后变化不大。
　　2.肌湿重:肱二头肌A组湿重为0.38±0.01g,肌皮神经切断后,B组和C组与A组比较,进行性减轻;屈肘重建后,D组与A组比较,逐渐回升,p<0.05。胸大肌斜部A组肌重0.37±0.01g,屈肘重建后,D1组与A组比较,下降2.70％,p<0.05;D2组已回升,与A组比较, p>0.05。
　　3. mRNA表达水平:肱二头肌和胸大肌斜部A组内ε-AChR表达水平分别为0.66±0.03和0.82±0.02,γ-AChR无表达。肱二头肌内ε-AChR的表达,B、C组与A组比较,逐渐下降,γ-AChR重新表达并逐渐上调;重建屈肘术后,D组与B2组比较,ε-AChR表达明显上调,γ-AChR下调,C组与B2组比较,结果相反,p<0.05。胸大肌斜部内ε-AChR表达,D1和D2组与A组比较,分别下降了14.63%、1.22%, D1组与A组比较,p<0.05,但D2组与A组比较,p>0.05;γ-AChR在D1组重新表达为0.18±0.01,D2组几乎消退,仅为0.01±0.01,D2组和D1组比较,下调明显, p<0.05。
　　4.蛋白表达:各组各时间点蛋白表达变化规律与mRNA表达相同,除A组外,各组各时间点的蛋白表达变化幅度均低于mRNA的表达。
　　结论:1. SD大鼠胸大肌斜部作为供体肌,建立屈肘重建术动物模型可行,能改善肱二头肌(受体肌)萎缩;
　　2.失肌皮神经后,肱二头肌内ε-AChR mRNA和蛋白表达逐渐下调,而γ-AChR重新表达并逐渐上调;屈肘重建术后,受体肌内这两个受体亚型的表达变化相反;
　　3.该屈肘重建术,供体肌内γ和ε-AChR仅一过性异常表达。

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前言

一、肌皮神经损伤与屈肘重建

二、肌肉型AChR的功能意义及神经损伤后的亚型表达变化

三、本文研究的焦点及意义

1材料与方法

1.1 实验动物分组与伦理

1.2 仪器设备

1.3 主要实验试剂

1.4 实验方法与步骤

1.4.1 大体解剖

1.4.2 肌皮神经离断术

1.4.3 胸大肌斜部移位重建屈肘功能术

1.4.4 观察与测量

1.4.5 RT-PCR检测

1.4.6western blot检测

1.5 统计学分析

2结果

2.1 大体观察

2.2 肌湿重

2.3 ε-AChR和γ-AChR mRNA表达变化

2.4 ε-AChR和γ-AChR 的蛋白表达

3 讨论

4 结论

参考文献

综述

致谢

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