人间变性大细胞淋巴瘤BALB/c小鼠建模的免疫学机制初探

摘要

目的:建立人源间变性大细胞淋巴瘤BALB/c小鼠模型,探讨其成瘤的免疫学机制。
　　方法:BALB/c小鼠以250mg/kg剂量的环磷酰胺(Cytoxan,CTX)腹腔注射预处理,3天后,右腋下皮下注射人间变性大细胞淋巴瘤细胞株 Karpas-299细胞0.5ml(1×107/ml),隔3d注射一次,共三次;运用流式细胞术检测成瘤组、未成瘤组小鼠和环磷酰胺对照组不同时间点外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD20+淋巴细胞比例。
　　结果:1、肿瘤病理活检显示肿瘤细胞呈巢状排列,体积大或中等,胞浆丰富,核分裂像常见,多见坏死组织。瘤细胞表达ALK,CD30,EMA,不表达CD20和CD45RO, Ki-67的增殖指数>80％。
　　2、成瘤组与环磷酰胺对照组相比,CD3+、CD8+、CD19+细胞比例明显降低(P<0.05);未成瘤组与环磷酰胺对照组相比,CD8+、CD19+细胞比例降低,CD20+细胞比例升高(P<0.05);未成瘤组与成瘤组相比,CD3+、CD4+、CD8+、CD20+细胞比例更高(P<0.05)。成瘤组CD3+、CD8+细胞比例下降与环磷酰胺对照组和未成瘤组相比均有意义(P<0.05),未成瘤组CD20+细胞比例升高与环磷酰胺对照组和成瘤组相比均有意义(P<0.05)。
　　3、环磷酰胺对照组第3天,BALB/c小鼠CD3+细胞比例高于注射 CTX前(即正常对照组)(P<0.05),CD19+细胞比例低于注射 CTX前(P<0.05);第10天,所测所有免疫参数值均低于注射CTX前,其中CD8+、CD19+、CD20+细胞比例下降有显著意义(P<0.05);第24天,CD8+、CD19+和CD20+细胞比例低于注射CTX前(P<0.05),CD3+、CD4+细胞比例与注射CTX前无差异(P>0.05)。
　　结论:1、成功建立人源间变性大细胞淋巴瘤 BALB/c小鼠模型。
　　2、环磷酰胺所致机体免疫抑制在成瘤起始阶段起到决定性作用,间变性大细胞淋巴瘤细胞的生长可能与CD3+、CD8+细胞明显下降有关。

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前言

1 材料

1.1 细胞和动物

1.2 主要实验试剂

1.3主要仪器及设备

1.4主要试剂配制

2 方法

2.1 实验动物的饲养：

2.2 karpas299细胞的复苏

2.3 karpas299细胞的换液和传代

2.4 karpas299细胞的冻存

2.5 karpas299细胞的收集

2.6 细胞计数方法

2.7 肿瘤模型的构建

2.8 肿瘤组织HE染色

2.9 肿瘤组织免疫组化染色

3 结果

4 讨论

5 结论

1 材料

1.1 主要实验试剂

1.2 主要实验仪器

1.3 主要试剂配制

2 方法

2.1 小鼠外周血的收集方法如下：

2.2 流式细胞术检测BALB/c小鼠外周血淋巴细胞亚群比例

2.3 统计学分析

3 结果

4 讨论

5结论

参考文献

综述

参考文献

致谢

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