三种内吗啡肽类似物的镇痛和成瘾性研究及分子模拟

摘要

内吗啡肽(endomorphins，EMS，Tyr-Pro-Trp/Phe-Phe-NH<,2>)是μ阿片受体(mu-opioid receptor，MOR)的内源性激动剂，对MOR具有很高的亲和力和选择性，并具有广泛的生理、药理效应，特别是在镇痛方面，其作用强度与吗啡相当，被视为潜在的可替代吗啡的深层次痛觉调节药物。但是阿片类药物长期使用会产生成瘾，限制了阿片药物的临床应用。造成成瘾的原因包括正性强化因素(欣快感、奖赏效应)、负性强化因素(逃避现实、减轻戒断症状)及条件性强化因素。位置偏爱(conditionedplace preference，CPP)实验是评价药物精神依赖性潜力的一种有效方法。截止到目前，国内外关于内吗啡肽及其类似物的位置偏爱效应研究仍很少，本文旨在研究内吗啡肽及其类似物的镇痛与位置偏爱效应的关系，并通过分子模拟的实验方法探讨可能的机制，以期发现具有潜在医学应用价值的阿片镇痛药物。 通过侧脑室注射EMS研究发现了EM-1的一个类似物[D-V<'4>-Bzl]EM1在具有很好的镇痛效果同时并不会产生条件性位置偏爱。热板实验结果证明60 min后[D-V<'4>-Bzl]EM1后仍能够产生明显的镇痛效应(6.67nmol/kg，icv，509﹪ MPE)，并且在规定的45min的条件性位置偏爱实验中却没有明显的奖赏性质。对照实验显示，吗啡和EM-1均能诱导镇痛和奖赏效应。我们推测[D-V<'4>-Bzl]EM1可能激活了不同的μ阿片受体亚型。这一类似物的发现对于开发新的阿片类镇痛药物具有积极的作用。 EM-2会产生条件性位置厌恶(conditioned place preference，CPA)，引入仅α-aminoxyacids后以3位为中心形成N-O转角结构的EM-2类似物Tyr-Pro-(L-aminoxyPhe)-PheNH<,2>和Tyr-Pro-(D-aminoxy Phe)-PheNH<,2>在热板实验中没有显示出很好的镇痛效果，在条件性位置实验中侧脑室注射5-20nmolkg<'-1>的两个类似物也没有产生条件性位置厌恶，而且3位是L-aminoxy Phe和D-aminoxy Phe的类似物之间几乎没有差别。 为了更进一步研究内吗啡肽及其类似物的结构特征、与受体相结合的机理，以及受体的激活机制，我们对内吗啡肽母体及其类似物进行了分子对接和分子模拟的实验。通过我们的计算机模拟试验发现：激动性越高的配体，越倾向形成结构上相对伸展的构型，我们推测这种结构可能有利于配体残基的侧链基团同受体的关键氨基酸相互作用；当结合了不同活性的激动剂后，受体的跨膜螺旋3，4，5和6区域都有着相似的运动方式，我们认为受体的这种“运动”方式很可能同其激活机制密切相关。

目录

声明

摘要

前言

1.内阿片肽简介

2.内吗啡肽研究进展

3.阿片类药物的条件性位置效应及其机制

4.内吗啡肽及其类似物的分子对接实验和动力学计算

材料和方法

1.材料

2.实验方法

3.分子对接及动力学计算

结果与分析

1.EMs及其类似物的镇痛作用

2.EMs及其类似物对大鼠的条件性位置偏爱影响

3.分子对接及动力学计算

讨论

参考文献

致谢