水栒子果实天然活性物质的筛选及活性研究

摘要

本文对蔷薇科枸子属(Cotoneaster Medikus)植物水枸子(Cotoneaster multiflorus Bunge)果实中生物活性物质进行了初步筛选，通过对各粗提物的抗氧化及抗肿瘤活性的初步研究，目的是寻找天然抗肿瘤和抗氧化活性物质，为更好地开发这种广为分布的植物资源提供实验依据。 通过DPPH法、ABTS法和邻苯三酚自氧化法对水枸子果实各相粗提物抗氧化活性进行测定，结果发现各相粗提物中均存在较高活性的抗氧化物质。乙酸乙酯相对自由基DPPH的清除活性最强EC50约为7.5μg/ml，水相EC50约为118.45μg/ml，石油醚相EC50约为174.34μg/ml。当剂量为50μg/ml时，乙酸乙酯相对自由基DPPH的清除活性已经达到91.86％，远远高于同等剂量下阳性对照BHA的清除活性78.26％。乙酸乙酯相对自由基ABTS的清除活性也为最强EC50约为 4.6μg/ml，水相EC50约为23.7μg/ml，石油醚相EC50约为26.1μg/ml。进一步以肝癌细胞株7721为材料，用MTT法进行体外抗肿瘤活性检测发现，乙酸乙酯相对细胞株的细胞毒效应最强，IC50为314.5μg/ml；石油醚相细胞毒效应IC50为387.3μg/ml；水相抗增殖能力最弱，IC50 512.7μg/ml。乙酸乙酯相的总多酚及总黄酮含量很高，与其高抗氧化活性相一致。 利用硅胶柱层析对水栒子果实乙酸乙酯相提取物进一步分离化，得到9个洗脱部分，其中洗脱剂为乙酸乙酯：石油醚=1:1的Fraction3部分显示出很高的抗氧化活性和一定的抗肿瘤活性。而且，Fraction3组分总多酚及总黄酮含量很高。抗氧化活性与总多酚、总黄酮之间有较高的相关性，暗示水枸子果实中起抗氧化作用的活性物质可能是总多酚及总黄酮类物质。 对活性较高的Fraction3和Fraction5两组分分别进行HPLC分析，Fraction3主要出现两个峰，主峰出峰时间为6.153min，Fraction5也主要出现两个峰，主峰出峰时间为5.264min。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章引言

1.1生物活性物质的研究意义

1.2抗氧化剂

1.3肿瘤及抗肿瘤活性物质

1.4植物次生代谢物的抗氧化、抗肿瘤研究现状

1.5实验材料介绍

第二章材料与方法

2.1材料

2.2水栒子果实各种粗提物的制备及性质研究

2.3抗氧化活性的研究

2.4抗肿瘤活性的研究

2.5水栒子果实有效成分的硅胶柱层析及活性检测

2.6水栒子果实有效成分的高效液相色谱法分析

第三章结果与分析

3.1水栒子果实各相粗提物的产率

3.2水栒子果实各相粗提物抗氧化活性

3.3水栒子果实各相粗提物抗细胞增殖活性的研究

3.4水栒子果实有效成分的分离纯化及活性检测

3.5水栒子果粗提物及乙酸乙酯相各洗脱部分活性物质含量

第四章讨论

第五章结论

参考文献

致 谢

附录：缩写