IFN-α-1b对TNF-α诱导NF-κB活性及EJ细胞凋亡的影响

摘要

目的:探讨联合使用TNF-α、IFN-α-1b对抗凋亡因子NF-κ B及其抑制因子Ⅰκ B-α的影响，同时研究联合或者单独使用TNF-α、IFN-α-1b对膀胱癌细胞系EJ细胞的细胞毒效应。 方法:应用Western blot蛋白印迹法去检测Ⅰκ B-α在不同时间段细胞内浓度变化。应用激光扫描共聚焦(CLSM)对NF-κ B p65进行定位显示。应用改良MTT比色法去检测EJ细胞的存活状态。 结果:单独使用IFN-α-1b组和IFN-α-1b联合TNF-α组之间对EJ细胞生长抑制率的比较有非常显著统计学意义(p=0.001)；单独使用TNF-α组和TNF-α联合IFN-α-1b组之间有显著统计学意义(p=0.022)。在两种联合作用情况下均可明显提高EJ细胞的生长抑制率，但以40ng/ml的TNF-α加入2ng/ml的IFN-α-1b时对EJ细胞的生长抑制作用最明显。ⅠκB-α在TNF-α诱导下随着时间的延长，其细胞内含量呈下降趋势：NF-κB p65成相反表达。加用IFN-α-1b后可翻转二者的表达情况。 结论: IFN-α-1b抑制TNF-α诱导下的NF-κB活性表达并增强TNF-α对膀胱癌EJ细胞株的细胞毒效应。大剂量、长时间使用TNF-α后，其抑制细胞生长的作用占优势。联合使用TNF-α和IFN-α-1b时可明显提高EJ细胞的生长抑制率，这和IFN-α-1b阻断NF-κB活性释放，增强TNF-α促细胞凋亡作用有关。应该引起注意的是联用TNF-α和IFN-α-1b抑制EJ细胞时以较小剂量TNF-α加有效剂量的IFN-α-1b效果最为明显，并以间隔最少45min使用为宜。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：中英文缩略词

声明

研究背景

1膀胱癌概述

2 NF-κB与细胞凋亡

3 IκB蛋白

4干扰素(Interferons IFNs)与干扰素-α(Interferons-α IFN-α)

5肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor TNF)与肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α TNF-α)

6相关研究现状

立论根据

研究重点与意义

材料和方法

1材料

2细胞培养

3改良四唑盐(MTT)比色法

4 Western blot分析

5免疫荧光激光扫描共聚焦

6统计学分析

结果

1联合使用TNF-α和IFN-α-1b可明显提高膀胱癌EJ细胞的生长抑制率

2 IFN-α-1b对TNF-α诱导下的EJ细胞IκB-α蛋白表达有明显的增强作用

3 IFN-α-1b对TNF-α诱导下的EJ细胞NF-κB p65蛋白表达有明显的抑制作用

讨论

1关于试验方法

2关于TNF-α、IFN-α-1b及二者联合使用72h时对EJ细胞的生长抑制

3关于TNF-α、IFN-α-1b及二者联合使用72h时EJ细胞IκB-α、NF-κB p65不同表达

结论

参考文献

攻读硕士学位期间撰写的论文

致谢