葡萄籽原花青素对自发性高血压大鼠肾脏结构和泌尿功能的影响

摘要

目的：研究葡萄籽原花青素（GSP）对自发性高血压大鼠（SHR）肾脏结构和泌尿功能的影响并探讨其可能机制。
　　方法：8周龄雄性SHR24只适应性喂养1 w后随机分成4组（ n=6）：SHR组（SHR）、GSP低剂量治疗组（GSP-low，50 mg/kg）、GSP高剂量治疗组（GSP-high，200 mg/kg）和卡托普利阳性对照治疗组（captopril，30 mg/kg）；6只同龄雄性Wistar-Kyoto大鼠设为正常对照组（control）。按照实验分组，给大鼠灌胃上述对应剂量药物及溶媒（2 ml/次/d），每2 w测量一次各组大鼠尾动脉收缩压（SBP）。6 w后，用代谢笼收集各组大鼠24 h尿液，测定24 h尿蛋白、视黄醛结合蛋白（RBP）和α1微球蛋白（α1-MG）含量。摘眼球取血，收集血清，测定血尿素氮（BUN），血肌酐（SCr）及胱抑素C（Cys C）含量。摘取大鼠两侧肾脏，肉眼观察肾脏大体形态，称量大鼠体重及左、右肾脏质量，计算肾脏质量指数（RMI）。HE和Masson染色下观察肾脏组织形态和胶原含量变化并测定肾内小动脉中膜与血管内径比值（MT/LD）、肾小球胶原纤维沉积评分（GCDS）及肾小管间质病变评分（TIDS）。测定左肾皮质中超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、总抗氧化能力（T-AOC）及丙二醛（MDA）含量。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肾皮质中细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2（p-ERK1/2）蛋白表达情况。
　　结果：灌胃给药6 w后，与control组比较，SHR组大鼠尾动脉SBP（2 w、4 w和6 w）、24 h尿蛋白、尿液中RBP和α1-MG含量、BUN、SCr、血清中Cys C含量、肾脏组织中胶原纤维、肾内小动脉MT/LD、GCDS和TIDS、肾皮质中MDA含量、ERK1/2和p-ERK1/2的蛋白表达均明显升高（P<0.01，P<0.05），而肾皮质中SOD、GSH-Px的活性和T-AOC均明显降低（P<0.05，P<0.01）；肾脏大体形态基本正常，两侧RWI均增大（P>0.05），肾小球、肾间质及肾小管均出现损伤性病理改变。与SHR组相比，GSP能显著降低大鼠尾动脉SBP（2 w、4 w和6 w）、24h尿蛋白、尿液中RBP和α1-MG含量、BUN、SCr、血清中CysC含量（ P<0.01， P<0.05）、肾脏组织中胶原含量、MT/LD、GCDS和TIDS及肾皮质中MDA含量、ERK1/2和p-ERK1/2的蛋白表达（P<0.05，P<0.01），升高肾皮质中SOD、GSH-Px的活性和T-AOC（P<0.01），改善肾脏的病理损伤。以高剂量GSP治疗组效果尤为显著（P<0.01），与captopril组疗效相当（P>0.05）。
　　结论：GSP可以有效改善SHR肾脏结构和泌尿功能的损伤，其机制与GSP具有降低SHR尾动脉SBP、提高SHR抗氧化应激能力和减少肾脏组织中ERK1/2和p-ERK1/2的蛋白表达的作用有关。