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人参皂苷Rd对早产儿PVL模型动物脑白质区MBP及tau蛋白表达的影响

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目的:通过制备早产儿脑室周围白质软化(PVL)动物模型检测脑室周围白质髓鞘碱性蛋白(Myelin basic protein,MBP)和tau蛋白表达,了解人参皂苷Rd 对PVL模型动物是否具有神经保护作用。 方法:选择 3 日龄新生 SD 大鼠分离结扎左侧颈总动脉并吸入 92%N2+8%O2低氧混合气体制作新生鼠脑室周围白质软化(PVL)模型,实验设置3组,分别为 PVL 模型组(结扎+缺氧,生理盐水腹腔注射)和人参皂苷Rd实验组(结扎+缺氧,人参皂苷Rd腹腔注射)、假手术组(只分离左侧颈总动脉,无结扎,不缺氧,等体积的生理盐水腹腔注射)。各组均于制模术后3天、7天、14天选取8只大鼠断头处死,通过 HE染色观察其脑组织病理改变、免疫组化检测脑室周围白质区MBP及tau蛋白的表达。 结果: 1、三组新生SD大鼠脑组织HE 染色 PVL模型组及实验组脑组织皮质损害相对较轻,而脑室周围白质损伤较重,为主要病变区域。人参皂苷Rd实验组及 PVL模型组在术后第3天白质区出现结构疏松,排列紊乱,脑细胞出现水肿、坏死,术后第7天脑细胞水肿稍减轻,反应性胶质细胞发生活化, 部分区域可见囊性坏死灶,左侧脑室较右侧稍扩大;术后14天时可观察到幼鼠脑白质软化灶及液化坏死灶增多、左侧脑室较右侧明显扩大。上述病理改变以PVL模型组最严重,人参皂苷Rd实验组较PVL模型组病变程度减轻,假手术组无病理改变。 2、免疫组织化学染色 2.1 三组新生SD大鼠脑室周围白质区 MBP的表达: PVL模型组、人参皂苷Rd实验组及假手术组的新生SD大鼠随着日龄的增加,脑室周围白质区MBP表达呈上升趋势;同时间点组间比较,假手术组 MBP表达量最多,实验组次之, PVL模型组表达最少,两两比较差异具有统计学意义(P<0.05); 2.2三组新生SD大鼠脑室周围白质区tau蛋白的表达:三组同时间点组间比较, PVL模型组脑室周围白质区 tau蛋白表达量最多,人参皂苷Rd实验组次之,假手术组表达量最少,各组间比较差异具有统计学意义( P<0.05); 结论: 1、人参皂苷Rd能减轻早产儿PVL模型动物脑白质区结构疏松、细胞水肿、坏死及软化灶的形成,减轻脑室扩大的程度等,提示人参皂苷对新生鼠脑白质损伤具有神经保护作用。 2、人参皂苷Rd使早产儿PVL模型动物的白质区髓鞘碱性蛋白(MBP)表达量增加,tau蛋白表达减少,提示人参皂苷Rd可能是通过促进少突胶质细胞分化成熟,减少轴突障碍,促进髓鞘化形成起到神经保护作用。

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