琼脂磁珠核酸信标配基HBsAg诊断试剂盒的研制

摘要

建立羧基琼脂磁珠核酸信标配基HBsAg诊断试剂盒，提高乙肝疾病的早期诊断率，为疾病的治疗提供帮助。
　　本实验以羧基琼脂磁珠为载体，以小鼠IgG的Fc核酸信标配基为检测分子以山羊抗人的乙肝多抗为捕捉体，以HBsAg为靶蛋白，形成磁珠-多抗-抗原-单抗-配基信标复合物，建立了双抗夹心免疫-PCR检测技术。结合全自动核酸提取仪，研制出试剂盒。免疫-PCR检测的结果显示，检测阈值为105～108拷贝数，蛋白浓度为10-3~10-6mg/mL有良好的线性关系，重复率为97％，具有实际检测意义。
　　由此得出：双抗夹心免疫-PCR检测技术结合全自动核酸提取仪可以准确地检测靶标蛋白，比传统ELSIA的检测灵敏度高出103倍，说明基于琼脂磁珠的核酸信标配基双抗夹心免疫-PCR检测技术建立成功，琼脂糖核酸信标配基HBV诊断试剂盒建立成功。该试剂盒具有特异性强、灵敏度高、重复性好、人为误差小、机械化程度高等优点。因此，在临床上对乙肝病毒感染的早期诊断和治疗具有重要的意义。

目录

声明

中英文缩写对照表

第一章 文献综述

1.1 常用的蛋白检测方法

1.2 微量蛋白检测方法

1.3 磁性微球

1.4 核酸适配体

1.5 HBV简介

第二章 材料和方法

2.1 材料与仪器

2.2 方法

第三章 实验结果

3.1 羧基磁珠

3.2 链霉亲和素磁珠

3.3 核酸信标配基制备技术研究

3.4 核酸信标配基检测试剂的优化

3.5 HBV全自动检测试剂盒的研制

第四章 讨 论

4.1 羧基琼脂磁珠

4.2 核酸信标配基

4.3 免疫-PCR检测技术

4.4 酶联免疫ELISA检测HBsAg的优缺点

4.5核酸信标配基PCR检测的优缺点

第五章 结论及展望

参考文献

硕士期间的科研成果

致谢