全反式视黄酸对胃癌细胞作用的分子机理

摘要

该文工作是以胃癌细胞MGc80-3、BGC823、SGC7901和MKN-45为材料,运用细胞生物学、分子生物学和生物化学等手段,研究全反式视黄酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对胃癌细胞作用的分子机理,为进一步将RA应用于胃癌及其他癌症的治疗提供理论依据.该论文工作表明,ATRA通过调控细胞周期相关基因的表达,进而抑制CDK2和CDK4的激酶活性,使Rb蛋白去磷酸化而导致细胞发生G<,0>/G<,1>期停滞;足够量的RARα的表达在介导ATRA对胃癌细胞的作用中有决定性的作用;RARβ的表达也是介导ATRA对胃癌细胞作用的重要因素;ATRA也可通过RARα的介导抑制AP-1的活性,这也与ATRA对胃癌细胞的作用密切相关.

目录

文摘

前言

一、视黄酸及其作用的分子机理研究

1、视黄酸在肿瘤预防和治疗中的作用

2、视黄酸作用的分子机理研究

二、细胞周期调控相关基因及其作用机理

1、Cyclin D1-CDK4/CDK6与肿瘤的关系

2、Cyclin E-CDK2与肿瘤的关系

3、CKI的作用

4、癌基因与细胞周期调控基因的关系

三、胃癌的分子病理及其治疗

1、胃癌的流行病学

2、胃癌发生、发展的分子机理

3、胃癌药物治疗的研究

四、本论文的研究目的与内容

材料与方法

一、材料

二、方法

1、细胞培养

2、药物处理

3、MTT法测定细胞生长抑制（Growth inhibition）

4、细胞周期分布的测定

5、质粒转化、鉴定及保存

6、质粒DNA的大量提取及纯化(碱裂解CsCl超速离心法)

7、RNA提取与Northern blot

8、蛋白提取与Western blot

9、免疫沉淀和激酶活性测定

11、氯霉素乙酰转移酶(CAT)活性测定

12、软琼脂集落形成实验

结果与分析

一、ATRA对胃癌细胞细胞周期和细胞周期相关基因的调控

1、ATRA引起细胞的G0/G1期停滞

2、ATRA对胃癌细胞周期调控相关基因的作用

二、RAR α对ATRA抑制胃癌细胞生长作用的介导

三、RAR β的表达也可介导ATRA对MKN45细胞的生长抑制作用

四、ATRA对胃癌细胞AP-1活性的调控

1、ATRA对胃癌细胞AP-1活性的调控

2、ATRA对c-fos和c-jun蛋白表达的抑制

3、RAR α对ATRA抑制AP-1活性的介导

讨论与结论

一、ATRA可通过调控细胞周期相关基因而抑制胃癌细胞的生长

1、.ATRA引起胃癌细胞发生G0/G1期停滞

2、ATRA通过调控细胞周期相关基因作用于胃癌细胞

二、RAR α介导ATRA对胃癌细胞的生长抑制作用

三、一定量的细胞内源RAR β的表达是ATRA抑制胃癌细胞生长的重要因素

四、ATRA可通过抑制AP-1活性而抑制胃癌细胞生长

五、结论与展望

参考文献

ABSTRACT

附录

致谢